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目的:观察5 氮杂-2’-脱氧胞音（5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR）对肺腺癌SPC-A-1细胞RAR-β、WIF1、RASSF2A基因甲基化状态的影响,探讨5-Aza-CdR对RAR-β、WIF1、RASSF2A基因表达缺陷的调控机制。方法:分别用不同处理浓度及不同作用时间的5-Aza-CdR对体外培养的人肺腺癌SPC-A-1细胞株进行处理。细胞株依据不同处理浓度分为A组（未处理组）及B、C、D组（分别加入3、6、12 μmol/L的5-Aza-CdR）,均于体外培养72h后待测。再依据不同作用时间分为24h、48h、72h、96h组,均加入12 μmol/L浓度的5-Aza-CdR。采用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测4组细胞（A、B、C、D组）RAR-β、WIF1、RASSF2A基因的甲基化状态差异,RT-PCR法分别检测不同浓度组及不同时间组RAR-β、WIF1、RASSF2A基因mRNA表达水平的差异,Western blot分别检测不同浓度组及不同时间组RAR-β、WIF1、RASSF2A蛋白表达水平的差异。结果:（1）A组标本检测出RAR-β、WIF1、RASSF2A基因均为甲基化状态,B、C、D组检测出RAR-β、WIF1、RASSF2A均为去甲基化状态;（2）不同浓度组中,A组的RAR-β、WIF1、RASSF2A基因mRNA及蛋白表达水平均最低,D组mRNA及蛋白表达水平最高（p＜0.05）。mRNA及蛋白表达水平随着5-Aza-CdR处理浓度升高而逐渐增强（p＜0.05）,mRNA与蛋白表达具有一定的浓度依赖性。此外,不同时间组中,72h组与96h组mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义（p＞0.05）,而在72h作用时间内,mRNA及蛋白表达水平随时间延长而逐渐增强（p＜0.05）,mRNA与蛋白表达具有一定的时间依赖性。结论:肺癌RAR-β、WIF1、RASSF2A基因因DNA高甲基化出现表达缺陷,甲基化是一个可逆转的过程,甲基化可作为肿瘤特异性治疗的靶点。5-Aza-CdR通过去甲基化作用可重新激活表达缺陷的RAR-β、WIF1、RASSF2A基因,从而使mRNA及蛋白表达水平明显上调,发挥抑癌作用。目的:探讨5-Aza-CdR对肺腺癌SPC-A-1细胞增殖及细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法:分别用不同处理浓度的5-Aza-CdR对体外培养的人肺腺癌SPC-A-1细胞株进行处理。分为A组（未处理组）及B、C、D组（分别加入3、6、12 μmol/L的5-Aza-CdR）,均于加药培养72h后待测。Western blot检测4组细胞Bcl-2、Bax蛋白表达水平的差异。流式细胞仪检测4组细胞周期及细胞凋亡率的差异。Hoechst33258染色法观察不同浓度5-Aza-CdR对肺腺癌SPC-A-1细胞凋亡的影响。结果:（1）4组中,随着5-Aza-CdR的处理浓度增加,Bcl-2蛋白表达水平逐渐下降,而Bax蛋白表达水平逐渐升高（p＜0.05）,5-Aza-CdR量效有一定的相关性;（2）B、C、D加药组与未处理A组比较,细胞总体凋亡率均有显著性升高（P＜0.05）,D组细胞总体凋亡率最高（17.45±1.82）%（P＜0.05）。随着5-Aza-CdR处理浓度的升高,处于G0/G1期的细胞比例明显升高（P＜0.05）,处于S期或G2/M期的细胞比例明显下降（P＜0.05）。5-Aza-CdR对细胞周期比例及细胞凋亡的影响呈一定的浓度依赖性。（3）D组RAR-β、WWIF1、RASSF2A、Bax蛋白表达水平均与细胞凋亡率成正相关（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达水平与细胞凋亡率成负相关（P＜0.05）。结论:5-Aza-CdR可干扰肺癌细胞周期,将细胞周期循环阻滞于G0/G1期,具有明显抑制细胞增殖的作用。5-Aza-CdR通过下调Bcl-2的表达及上调Bax的表达,并通过去甲基化作用上调RAR-β、WIF1、RASSF2A的表达,可诱导细胞凋亡,发挥抗癌效应。目的:探讨5-Aza-CdR对人肺癌移植瘤裸鼠的抑瘤作用及可能的作用机制。方法:构建人肺腺癌SPC-A-1细胞移植瘤裸鼠的模型,将接种成瘤的40只裸鼠随机分为模型组及治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组各10只。模型组裸鼠给予生理盐水灌胃,隔日一次,按裸鼠体质量计算,治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ工组裸鼠分别腹腔注射0,5 μg/g、1μg/g、2μg/g单位剂量的5-Aza-CdR注射液,隔日一次,治疗共持续4周。测定4组裸鼠肿瘤体积与体质量,计算抑瘤率,观察不同剂量的5-Aza-CdR对人肺癌裸鼠移植瘤的生长影响及对荷瘤裸鼠的毒副作用,MSP方法检测5-Aza-CdR治疗前后的移植瘤RAR-β、WIF1、RASSF2A甲基化状态的差异,Western blot技术检测4组裸鼠移植瘤RAR-β、WIF1、RASSF2A蛋白表达的差异。结果:（1）5-Aza-CdR治疗4周后,治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组肿瘤平均体积和体质量与模型组比较均明显减小（P＜0.05）,且肿瘤平均体积和体质量随着5-Aza-CdR治疗剂量的增加而明显减小（P＜0.05）,抑瘤率随着5-Aza-CdR治疗剂量的增加而明显升高,抑瘤效应呈剂量依赖性。（2）模型组移植瘤标本检测出RAR-β、WIF1、RASSF2A基因均为甲基化状态,治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组检测出RAR-β、WIF1、RASSF2A 均发生去甲基化。（3）模型组的 RAR-β、WIF1、RASSF2A蛋白表达水平在4组中最低,治疗Ⅲ组蛋白表达水平最高（p＜0.05）,蛋白表达水平随着5-Aza-CdR治疗剂量增加而逐渐升高（p＜0.05）,蛋白表达具有一定的剂量依赖性。结论:5-Aza-CdR能抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长,可能是通过去甲基化上调抑癌基因RAR-β、WIF1、RASSF2A的表达,进而诱导细胞凋亡来实现抑瘤作用。通过探索5-Aza-CdR的体内外抗肿瘤作用机制,可能为今后肺癌的临床综合治疗提供一种新的方法和理论依据。