论文部分内容阅读
本文以多孔淀粉作为载体制备多孔纳米载药系统，用以提高难溶性药物普罗布考的口服生物利用度。普罗布考为降血脂药，具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、抗经皮经腔冠状动脉成形术后再狭窄等作用，疗效好、副作用小。但由于其水溶性较差，在胃肠道的溶解度小，口服难以吸收，导致生物利用度低，严重限制了药效发挥和临床应用。 本文建立普罗布考体外超高效液相(UPLC)检测方法。色谱柱为ACQUITYUPLC()BEH C18柱(2.1 mm×100 mm，1.7μm)；流动相为乙腈-水(94:6)；检测波长为242 nm；流速为0.5 mL·min-1；柱温为35℃。普罗布考的保留时间为1.7 min，在1.00～100.0μg·mL-1范围内呈良好的线性相关性，回归方程为A=4247C+1156.8(r=0.9999)；该方法操作简单，出峰时间快，专属性强，准确度、精密度均符合要求，可用于普罗布考含量测定、多孔纳米载药系统的质量评价。 以振摇法制备PSP(Probucol Loaded Porous Starch)，并以普罗布考的平衡溶解度为主要评价指标进行处方筛选。通过单因素试验，考察投料比、溶剂种类、摇床转速、药物浓度的影响。在多孔纳米载药系统PSM(Self MicroemulsionLoaded Porous Starch)制备中，以药物在各溶媒中的平衡溶解度筛选出油相、表面活性剂和助表面活性剂，再以三元相图确定乳化区域制备普罗布考自微乳，最后装载入多孔淀粉制得PSM。 对PSP和PSM进行表征，结果表明，PSP分散过程中释放出170～230 nm的纳米晶体级药物颗粒，PSM在分散过程中自组装形成20～50 nm的纳米载药系统，与ESEM和TEM相对应，DSC和XRD显示PSP中药物以晶体形式存在，PSM中则以无定型或分子形式存在，PSP在HCl(pH1.2)和磷酸盐缓冲(pH6.8)溶液中累积释放度均达到5％，PSM在两种介质中累积释放度可则均可达到80％。 PSP和PSM在高温、高湿和强光照射条件下有关物质的测定情况显示：10天后普罗布考在高温、高湿和强光照射条件下的有关物质分别为0.71％、0.61％和0.74％，PSP的有关物质分别为0.75％、0.69％和0.64％，而PSM的有关物质分别为1.95％、0.83％和0.85％。 本文建立的超高效液相方法也成功应用于大鼠小肠部位的药物分布和细胞摄取研究。与普罗布考对照相比，大鼠小肠部位药物分布结果表明口服给予PSP和PSM2h、6h和24h后，肠道中的药物浓度均有明显提高。其中口服给药6h提高较为明显，在十二指肠、空肠和回肠三个部位中，与对照相比，PSP分别提高了2.66倍、2.23倍和1.98倍，而PSM则分别提高了7.17、15.99和33.61倍。荧光标记PSM后，通过共聚焦相微镜观察到给药2h后药物主要分布在十二指肠和空肠，表明口服后药物被近端肠道快速吸收，摄取量随着肠道的延伸而逐渐减少。在Caco-2细胞摄取中，PSP和普罗布考列照没有明显区别，但是PSM在60min时的摄取量提高了2.77倍，激光共聚焦显微镜也说明了药物能够较好地被摄取进入细胞。 建立了HPLC测定普罗布考体内药动学的方法，普罗布考在0.05～5μg·mL-1范围内，线性关系良好，其回归方程为A=64183C+202.57(r=0.9996)。SD大鼠口服PSP后，Cmax为189=26 ng·mL-1，Tmax为6±0.79 h，AUC(0-t)为3487±334ng·h·mL-1，t1/2为13.53±4.53h；口服PSM后，Cmax为839±35 ng·mL-1，Tmax为5.4±1.79 h，AUC(0-t)为12940±3236 ng·h·mL-1，t1/2为21.52±5.69 h，研究结果表明，多孔纳米载药系统显著提高了血药浓度和生物利用度，与普罗布考对照组相比，PSP和PSM口服生物利用度分别提高了2.69和9.96倍。