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目的探讨足细胞自噬对高血压肾损伤的影响,通过体内外实验明确潜阳育阴颗粒对高血压所致肾损伤的治疗效果,证实潜阳育阴颗粒可降低足细胞自噬水平从而治疗高血压早期肾损伤,为该药的推广与应用奠定一定的基础,也为高血压中医思路的拓宽与开发献出一份力量。方法实验一:以自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,利用潜阳育阴颗粒进行干预。观察大鼠血压变化,检测尿液和血液中肾损伤相关代谢指标,HE染色观察大鼠肾皮质中肾小球、肾小管的病理结构特点,透射电子显微镜观察肾脏足细胞形态、细胞器变化及自噬体数量。确定长期高血压大鼠的肾损伤情况,以及潜阳育阴颗粒对于高血压致肾损伤大鼠的相关指标及肾小球足细胞损伤的改善作用;实验二:SD大鼠药物干预1周制备含药血清。体外培养大鼠足细胞,确定AngⅡ造模浓度,利用潜阳育阴低、中、高剂量组含药血清干预,以缬沙坦含药血清为阳性对照,Western Blot检测足细胞自噬相关LC3 Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin和P62的水平,观察潜阳育阴含药血清对足细胞自噬水平的影响;实验三:免疫荧光技术观察潜阳育阴含药血清对足细胞TRPC 6钙通道蛋白和p-mTOR蛋白的影响,钙离子成像检测细胞内Ca2+水平,Western Blot观察各组足细胞p-AMPK/AMPK变化,了解潜阳育阴含药血清抑制足细胞自噬的可能作用靶点,为探讨潜阳育阴颗粒改善高血压肾损伤的机制奠定基础。结果实验一:SHR模型组大鼠血压及肾损伤相关代谢指标明显高于WKY组大鼠,肾小球萎缩,肾小管扩张,肾皮质内有较多纤维化样组织生成,足细胞内自噬小体增加,足突发生广泛融合;潜阳育阴颗粒可明显降低SHR大鼠血压水平,对高血压所致肾小球、足细胞病理性损伤有较好的改善作用,疗效与剂量相关;实验二:AngⅡ可抑制大鼠足细胞增殖,提高足细胞自噬相关蛋白LC3 B、Beclin的表达,降低胞内P62水平;潜阳育阴含药血清对AngⅡ抑制足细胞增殖有明显的改善作用,可抑制LC3 B、Beclin蛋白表达,并提高P62蛋白水平,对AngⅡ所致足细胞过度自噬有明显改善。实验三:AngⅡ可增加足细胞TRPC6蛋白的表达,提高胞内Ca2+浓度,同时增加足细胞自噬相关蛋白的表达,激活自噬。而潜阳育阴颗粒可抑制AngⅡ所致TRPC 6蛋白高表达,降低胞内Ca2+浓度,并抑制自噬。结论(1)潜阳育阴颗粒对高血压所致肾脏病理性损伤具有较好的改善作用(2)高血压致肾脏足细胞自噬异常激活可能参与高血压肾损伤的形成(3)潜阳育阴颗粒可能通过肾脏足细胞TRPC6蛋白,抑制胞内Ca2+水平,从而抑制足细胞过度自噬