第一部分Riccardin D对APCMin+小鼠肠微腺瘤的化学预防作用研究APC抑癌基因的突变在多数肠道癌症发展过程中是最初发生的分子水平的改变,APC基因突变的小鼠模型ApcMin+小鼠在肠腺瘤预防研究中是十分有效的模型之一。双联苄类化合物是广泛存在于从苔藓类植物中的一类新型酚类家族天然化合物,Riccardin D是从苔藓植物地钱Dumortiera hirsuta中分离所得的多种新型的大环双联卞类化合物之一。前期试验基础发现Riccardin D具有一系列如抗真菌和抗微生物作用,抗氧化作用,抗血小板凝集作用,良好的细胞毒性以及对环氧合酶、钙调蛋白和5-脂氧合酶的抑制作用等比较好的生物学活性。本课题旨在评价其对APCMin+小鼠肠道微腺瘤的抑制作用及其作用机制。试验方法小鼠剪尾提取DNA鉴定突变型ApcMin+小鼠,阴性对照组和给药组随机分组各10只,五周龄时开始口服给药,连续给药七周。给药结束后处死小鼠,计数小肠及结肠内腺瘤息肉的数目和大小分布情况,并于光镜下做病理学检查。体内生化指标主要采用免疫组织化学,TUNEL,免疫印迹,RT-PCR和ELISA实验检测Riccardin D对相关因子的调控作用研究其作用机制。体外采用CCK-8, Hochest33258,免疫印迹,荧光素酶报告基因法等佐证体内实验的结果,进一步确认Riccardin D预防小鼠肠腺瘤发展进程的作用机制。试验结果Riccardin D治疗能有效抑制小鼠肠腺瘤形成和发展,小肠前中后段息肉数分别降低了41.7%,31.1%,44.4%。Riccardin D预防作用最明显的部位在结肠段,抑制率达79.3%。息肉大小分布分析显示Riccardin D对较大息肉(2-3mm)的抑制率在小肠前中后段结肠段分别为40.0%,42.5%,33.3%,77.8%。组织病理学分析表明Riccardin D治疗组小鼠肠道息肉基本没有明显的增生形态学恶化现象。分子水平分析发现Riccardin D抑制腺瘤形成与其抗细胞增殖,促凋亡,抗血管生成和抗炎作用有关。试验结论Riccardin D具有较强的预防APCMin+小鼠肠腺瘤生长的作用,其机制可能是Riccardin D抗细胞恶性增殖,促凋亡,抗血管生成和抗炎综合作用共同发挥作用。第二部分乳香酸对ApcMin+小鼠肠微腺瘤的化学预防作用研究对于结肠癌炎症相关因素的研究资料日渐丰富,临床发现非甾体类抗炎药物具有较好抑制炎症信号产生与激活作用等一些阶段性成果。事实证明,有针对性的服用具有抗炎效果的低毒或者无毒的抗炎药物,可能对预防结肠癌的发生有重要意义。乙酰基-11-酮基-beta-乳香酸(AKBA)是从Boswellia serrata植物树胶中提取的乳香酸类有效成分。乳香酸常用在方剂佐剂中用于治疗某些炎性疾病,具有很好的抗炎效果。本课题旨在评价乳香酸AKBA作为预防性药物预防APC基因突变的APCMin+小鼠肠道腺瘤的效果。试验方法经鉴定的突变型APCMin+小鼠,阴性对照组和给药组随机分组每组各10只,五周龄时开始口服给药,连续给药八周。给药结束后处死小鼠,计数小肠及结肠内息肉的数目和大小分布情况,并于光镜下做病理学检查。采用免疫组织化学,TUNEL,免疫印迹,(?)(?)ELISA实验检(?)(?)AKBA的抗炎效果,对Wnt信号通路的影响和对细胞增殖凋亡的调控作用。试验结果AKBA(?)(?)有效抑制小鼠肠腺瘤形成和发展,尤其在结肠段预防作用最明显,息肉大小和数目得到抑制,息肉外观也有所改善,在小肠和结肠段息肉数抑制率分别达48.9%(p<0.001),60.4%(p=0.005)。病理学检查也表明AKBA能够明显抑制肿瘤发展的趋势,作用效果在结肠段更为显著。分子水平分析发现AKBA能够抑制腺瘤形成,主要作用方式和影响的过程包括细胞增殖,凋亡调控,抗血管生成及其显著的抗炎作用,即对炎症因子的调控。试验结论AKBA能有效预防APCMin+小鼠肠腺瘤生长,其机制可能是AKBA的抗炎作用主导下,发挥其抗细胞恶性增殖,促凋亡,抗血管生成等综合作用,并能够直接调控Wnt-信号途径,最终有效预防了小鼠肠道内微腺瘤的发生和发展。