大肠杆菌O157噬菌体的分离鉴定及其初步应用

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本研究以大肠杆菌O157为宿主菌,从污水中分离筛选到一株强裂解性噬菌体DLSF48,该噬菌体噬菌斑直径约7mm,边缘清晰,效价在10~9pfu/mL以上,对细菌的特异性裂解能力强。对DLSF48生物学特性研究结果表明:该噬菌体的最适生长温度为37℃,最适pH值为8;在70℃作用20min及在pH值4~12的环境中2h仍可保持较高的裂解活性;对氯仿和乙醚有抗性;最佳感染复数在0.1~0.01,感染宿主菌的潜伏期是20min,裂解期为70min,裂解量为99。电镜观察显示,该噬菌体头部呈正二十面体,直径约50nm,尾长约120nm,尾径约4nm,无被膜;SDS-PAGE鉴定,该噬菌体至少含有6种结构蛋白;噬菌体的基因组为线型双链DNA,大小约为30 kb左右。经综合鉴定,该噬菌体属于长尾噬菌体科T1噬菌体属;通过基因组测序结果和同源性分析显示,该噬菌体为一种新发现的噬菌体。噬菌体治疗结果表明:口服噬菌体有明显的治疗效果,在感染O157的同时口服接种噬菌体,接种噬菌体的剂量为2×10~6pfu以上,3h后剂量为2×10~7pfu以上,6h后剂量为2×10~8pfu以上,对小鼠可完全保护。模拟水污染大肠杆菌O157研究噬菌体的净化效果,结果显示噬菌体DLSF48对水体中的大肠杆菌O157有明显的清除作用。本研究发现一种新的特异性裂解大肠杆菌O157的长尾噬菌体,研究了该噬菌体的生物学特性,并在大肠杆菌O157感染的治疗及水环境净化上进行了初步研究。
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