药物(FK1706)干预对脊髓打击损伤大鼠行为学改变的研究

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目的:本文旨在研究FK1706治疗T8脊髓打击损伤大鼠行为学改变情况,探讨FK1706应用于脊髓损伤治疗上的可能性。方法:成年雄性健康Sprague-Dawley(SD)大鼠55只,体重200-250g。随机分成A组:假手术组,B组:单纯损伤组,C组:甲强龙组,D组:FK1706组,E组:联合用药组,每组11只。采用自制改良脊髓打击器对T8脊髓进行打击造模,之后随机抽取3只进行SEP监测。B、C、D、E每组11只大鼠均符合形态学改变,且抽取的3只大鼠均符合SEP监测标准时,表示造模成功(A组大鼠只需符合形态学改变即可,造模完成后从中随机剔除3只)。第一部分在大鼠造模成功后,进行药物干预:C组建模成功后,即刻尾静脉注射甲强龙(40mg/kg),A、B、D三组尾静脉注射同等剂量的生理盐水;D组建模成功后,即刻尾静脉注射FK1706(1 mg/kg),A、B、C三组大鼠尾静脉注射同等剂量的生理盐水;E组建模成功后,即刻尾静脉注射甲强龙(40mg/kg),即刻尾静脉注射FK1706(1 mg/kg)。干预完成12h后处死大鼠,采集T8脊髓节段损伤上下0.5cm脊髓进行real-time PCR反应,检测大鼠T8脊髓样本中IL-1β基因相对含量。第二部分在大鼠造模成功后,进行药物干预:C组建模成功后,即刻尾静脉注射甲强龙(40mg/kg),A、B、D三组尾静脉注射同等剂量的生理盐水;D组建模成功后,即刻尾静脉注射FK1706(1 mg/kg),连续注射35天(包含术日),A、B、C三组大鼠尾静脉注射同等剂量的生理盐水;E组建模成功后,即刻尾静脉注射甲强龙(40mg/kg)+FK1706(1 mg/kg),并连续注射35天(包含术日)。各组采用BBB评分法、斜板试验,分别在术后3d、1w、2w、3w、4w、5w时进行大鼠双后肢行为学功能评分,以观察药物干预对脊髓打击损伤大鼠行为学改变的影响。结果:第一部分:IL-1β的表达水平假手术组与其他各组相比具有统计学差异(P<0.05);FK1706组与单纯打击组相比无统计学差异(P>0.05);FK1706组显著高于甲强龙组(P<0.05);甲强龙组与联合用药组相比无统计学差异(P>0.05)。第二部分:实验过程中,B组大鼠死亡1只,C组大鼠死亡2只,均及时进行了补充。1、BBB评分结果:除假手术组外,其余各组在术后3d的评分无统计学差异(p>0.05)。在术后1w,甲强龙组、联合用药组均高于单纯打击组(p<0.05);第2w、第3w、第4w,第5w时,甲强龙组、FK1706组、联合用药组均高于单纯打击组(p<0.05)。在第4w时,甲强龙组高于单纯打击组,差别具有统计学差异(p<0.05);FK1706高于甲强龙组,差别具有统计学意义(p<0.05);FK1706组、甲强龙组、联合用药组进行方差分析具有统计学意义(p<0.05)。2、斜板试验结果:第3d、1w时,FK1706与单纯打击组相比无统计学差异(p>0.05),但在第2w至第5w时FK1706组显著高于单纯打击组,差别具有统计学意义(p<0.05)。甲强龙组与联合用药组在第3d、1w时相比差别无统计学意义(p>0.05),而在之后的2-5w联合用药组高于甲强龙组,差别具有统计学意义(p<0.05)。在第1w、2w,甲强龙组高于FK1706组,差别具有统计学意义(p<0.05),在3w时两者无统计学差异(p>0.05),在第4w、5w时FK1706组高于甲强龙组,差别具有统计学意义(p<0.05)。联合用药组在各个时间段斜板试验评分均高于FK1706组,差别具有统计学意义(p<0.05)。结论1、甲强龙对IL-1β抑制作用明显;FK1706对IL-1β基本无抑制作用;联合用药组(甲强龙+FK1706)仅仅体现出甲强龙的效应,而FK1706无协同抑制IL-1β的作用。2、FK1706治疗脊髓损伤大鼠的疗效优于甲强龙。3、甲强龙与FK1706在脊髓损伤的治疗过程中具有相互促进作用。
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