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上颚腺是蜜蜂生活中非常重要的外分泌腺之一。10-羟基-2-癸烯酸(10-hydroxy-2-decenoicacid,10-HDA)不仅是工蜂上颚腺的主要分泌物,还是王浆中最主要的不饱和脂肪酸成分。10-HDA不仅是王浆中重要的抑菌成分,还是参与雌性蜜蜂级型分化的重要活性物质。中蜂(Apis cerana cerna)是我国重要的本地蜂种资源,有许多不同于西方蜜蜂的生物学特性,为了弄清中蜂工蜂上颚腺中10-HDA合成与分泌规律,本研究对不同日龄中华蜜蜂工蜂上颚腺10-HDA的分泌规律进行了研究,并应用蛋白质组学技术比较了不同日龄工蜂上颚腺腺体蛋白差异。通过 HPLC 法测定了 0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50 和 55 日龄中华蜜蜂工蜂头部10-HDA的含量变化,结果发现,0日龄工蜂头部10-HDA含量很低,平均为0.43±0.24μg/bee,5日龄时为4.25±0.83μg/bee(P<0.01);到10日龄时显著升高到5.56±0.71μg/bee(P<0.05),此时头部10-HDA的含量约为0日龄时的十几倍;15日龄时略有下降,但与10日龄无统计学差异(P>0.05);随后则开始显著下降(P<0.05);从25日龄开始,其含量和0日龄时的含量相近(P>0.05)。应用双向电泳技术对0、10、15、20、25和30日龄中华蜜蜂工蜂上颚腺进行了蛋白检测,并利用质谱对差异蛋白点进行了鉴定。共在中华蜜蜂上颚腺中鉴定到18个特征蛋白点,主要为细胞骨架和细胞结构蛋白、膜受体和细胞信号相关蛋白、应激蛋白、线粒体和能量产生相关蛋白等。在完成不同日龄中华蜜蜂工蜂上颚腺中10-HDA分泌规律的基础上,进一步采用iTRAQ标记结合二维液相色谱串联质谱技术对0日龄和10日龄中华蜜蜂工蜂上颚腺的蛋白质进行了分离和分析。在0日龄和10日龄中华蜜蜂上颚腺中共鉴定到829个蛋白质,182个在中华蜜蜂工蜂不同发育阶段具有差异性,其中上调蛋白质89个,下调蛋白质93个。其中,10日龄工蜂上颚腺中的脂肪酸合成酶显著高于0日龄,是导致10-HDA含量差异的关键蛋白之一。对这些蛋白功能的解析将有助于揭示上颚腺10-HDA合成途径。