采用偏振光显微镜分析透明带在受精过程中的作用

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nish2008
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第一部分采用偏振光显微镜对受精前后及异常受精卵透明带的观察研究目的采用偏振光显微镜(polarized light microscope, Polscope)观察并测量人卵子及合子透明带密度(zona pellucida density, ZPD)、透明带厚度(zona pellucida thickness, ZPT),分析体外成熟过程中透明带(zona pellucida, ZP)的变化及受精后ZP的变化、不同授精方式受精后合子ZP的差别、及相同体外授精方式(in vitro fertilization, IVF)中ZP与不同受精结局的相关性。方法IVF授精后18-20 h采用偏振光显微镜对68例中248枚受精卵和60枚未成熟卵子摄像;单精子胞浆内显微注射(Intracytoplasmic sperm injection, ICSI)授精后18-20 h对11例中61枚受精卵子摄像;另外36个ICSI周期127枚卵子,卵子取出2-4 h后拆除颗粒细胞,摄像。软件测量所拍摄图像的ZP,分析成熟过程中及受精后ZP的变化、不同受精方式ZP的差别及不同受精结局ZP的差别。结果未成熟卵全层ZPT、内层ZPD和ZPT高于成熟卵子,IVF受精后各层ZPT、ZPD显著增大(2.49±0.49, 8.79±1.91, 19.33±2.28 vs. 2.14±0.52, 7.98±1.73, 16.54±2.43; p<0.05);IVF和ICSI授精后受精卵ZP有显著差别;IVF中3原核(3 pronuclear, 3PN)受精卵内层ZPT低于2PN(8.19±1.68 vs. 8.79±1.91; p<0.05),0PN全层及内层ZPT、ZPD均高于2PN(2.81±0.69, 9.55±1.45, 20.79±3.41 vs. 2.14±0.52, 7.98±1.73, 16.54±2.43; p<0.05)。结论成熟度不同卵子密度和厚度不同,卵子受精后ZPT、ZPD发生变化;不同授精方式ZP存在差别;受精卵ZP结构与受精结局有相关性。第二部分6h短时授精与18h隔夜授精透明带变化的随机自身对照研究目的6 h与18 h精卵共培养组间受精卵ZP和胚胎质量的关系方法21周期258枚卵子随机分6 h和18 h精卵共培养组自身对照,受精后20 h偏振光显微镜摄像,分析两组间正常受精卵ZP和胚胎质量的差异。结果6 h与18 h组比较,受精率及多精受精率没有差异,可移植胚胎率略高(70.1% vs. 63.27%)无统计差异,移植胚胎所占比率高(67.80 vs. 37.21%)。6 h组中正常受精卵内层、全层透明带厚度(zona pellucida thickness, ZPT),内层透明带密度(zona pellucida density, ZPD)(8.28±1.28, 18.97±2.64, 2.09±0.50vs. 8.86±1.52, 19.57±2.66, 2.24±0.67)低于18 h组;发育为可移植胚胎的受精卵ZPD (2.07±0.49 vs. 2.26±0.72)显著低于18 h组,而发育为不可移植胚胎的受精卵外层ZPT (9.14±2.46 vs. 7.74±1.37)高于18 h组。结论短时受精组合子透明带内层厚度、密度较传统隔夜受精组合子低,这可能有利于胚胎孵出。
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