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L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶（GalLDH）是催化植物体内抗坏血酸生物合成最后一步的关键酶。本实验研究了正常生长条件下和Cu胁迫条件下Vc合成代谢过程相关酶的变化,并为利用基因工程提高抗坏血酸含量,增加不结球白菜的营养价值,提高其对环境胁迫的适应能力奠定基础。1.通过测定不结球白菜品种（‘常州乌塌菜’、‘矮脚黄’和‘二青’）生长过程中维生素C（AsA）含量、L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶（GalLDH）、抗坏血酸氧化酶（AAO）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）、单脱氢抗坏血酸还原酶（MDAR）和脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）的活性,发现AsA含量的积累呈先升高后下降的模式,且‘常州乌塌菜’中的AsA含量显著高于‘矮脚黄’和‘二青’。GalLDH活性与AsA含量变化趋势基本一致,且3个品种中GalLDH活性与AsA积累之间呈极显著的正相关关系。AAO和APX活性的变化趋势则与AsA含量变化趋势相反,而‘常州乌塌菜’中AAO活性显著低于其它两个品种,但APX活性无显著差异。MDAR和DHAR的活性则主要表现在生长后期。结果表明,不结球白菜中AsA含量主要受GalLDH酶活性调节,同时AsA代谢酶AAO也对AsA积累起到了重要作用,而MDAR、DHAR酶活性对AsA积累的作用主要在生长后期。2.在10μM CuSO4胁迫下,对不结球白菜生物量、AsA含量、AsA合成代谢相关酶L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶（GalLDH）、抗坏血酸氧化酶（AAO）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）、单脱氢抗坏血酸还原酶（MDAR）、脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）活性和抗氧化酶超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）活性的变化进行了研究。结果表明,Cu胁迫下两个品种中地上部和根鲜重均下降,然而与‘二青’相比,‘常州乌塌菜’中的下降量少。‘常州乌塌菜’的高耐铜性可能是由于高AsA含量,而AsA含量的升高主要是因为分解酶-AAO和APX-活性低,并且DHAR活性比‘二青’高。另一方面,与‘二青’相比,‘常州乌塌菜’中CAT和POD活性升高对耐铜性也起了很大作用。3.在不同Cu浓度胁迫下,对不结球白菜光合作用、叶绿素荧光参数、生物量、叶绿素含量、抗氧化剂和抗氧化酶活性,以及Vc分解过程酶活性的变化进行了研究。结果表明,不结球白菜不同品种在Cu处理下有很大差异。‘常州乌塌菜’耐铜性较‘二青’强,并且叶绿素含量和Vc含量高于‘二青’。抗氧化酶和AsA分解酶也表现出类似的趋势以保护不结球白菜减少氧化胁迫。而在10μM Cu处理下不结球白菜在生物量、叶绿素含量、Vc含量以及叶绿素荧光、抗氧化酶和AsA分解酶等方面比对照表现好。4.在75μM CuSO4胁迫下,对不结球白菜不同处理时期AsA含量进行了研究,并用实时荧光定量PCR技术研究了Cu胁迫对Vc合成关键酶GalLDH基因表达的影响。结果表明,Cu处理后,不结球白菜AsA含量上升,且高于对照。而GalLDH基因的表达随着Cu处理时间的变化而表现出极显著增加（P＜0.05）,但相比对照GalLDH基因表达有下降的趋势。这表明在Cu胁迫下,不结球白菜GalLDH基因的表达并不是AsA含量的变化的主要因素,这与本实验其它部分一致。而‘常州乌塌菜’中AsA含量和GalLDH基因的表达均比‘二青’高。Southem杂交结果显示,不结球白菜GalLDH基因在不结球白菜基因组中为多拷贝。