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目的:肺纤维化是呼吸系统中严重危害人类健康的一组疾病。它是以慢性创伤形成和细胞外基质(extracelluar matrix, ECM)沉积为特点的疾病,进而导致肺功能的破坏和出现呼吸衰竭。也就是说,它是以过多的ECM产生和沉积为特征的疾病,这个过程通常需要很多年,并且能够导致肺功能损害和丧失。目前发病机制尚不明确,临床上缺乏有效的治疗方案。尽管已形成的纤维化不可逆转,但肺纤维化是一个进行性慢性病理过程,探索肺纤维化发病的分子机制以寻找新的干预靶点,对延缓或阻断肺纤维化进展具有重要意义。在纤维化的发展过程中,转化生长因子-β( transforming growth factor-β, TGF-β)促纤维化的作用是肯定的。TGF-β诱导成纤维细胞合成和积聚ECM,长期以来,它被看作是一个重要的纤维化应答调节子。TGF-β通过调控ECM生成细胞的转录或转录后水平,促进各种ECM表达,并能诱导成纤维细胞等多种细胞合成和分泌细胞外基质蛋白并抑制其降解。然而,通过TGF-β介导的纤维化应答信号转导通路,是由TGF-β与其受体结合后来实现信号通路的激活,进而诱导一系列的信号转导过程,实现它的生物学效应。而TGF-β依赖转化生长因子-βⅡ型受体(transforming growth factor-βⅡtype receptor, TGF-βRⅡ)发挥作用,只有二者在细胞表面结合后才能诱发信号转导通路。研究表明,TGF-βRⅡ包括TβR-Ⅱ、ActR-Ⅱ、ActR-ⅡB、BMPR-Ⅱ和AMHR-Ⅱ五种亚型,但究竟亚型中的哪些因子参与了肺纤维化的形成过程,目前尚未明确。本研究以博来霉素(bleomycin, BLM)诱导的肺纤维化大鼠为模型,观察肺纤维化过程中TGF-βRⅡ各亚型表达的变化,为今后临床肺纤维化的治疗提供干预靶点。方法:1.实验动物:6周龄SD大鼠,雌性,体重180g-220g。2.动物模型制备:大鼠经乙醚麻醉后,颈前暴露气管,一次性气管内注入0.4% BLM生理盐水注射液(5mg/kg)。3.分组:共分两组,每组各36只大鼠。(1)肺纤维化组(用F代表)分为6个亚组:F1、F3、F7、F14、F28、F35组,分别代表给予BLM后第1、3、7、14、28、35天后处死;(2)正常对照组(用N代表):取同期大鼠处死。4.研究方法:应用苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理形态学变化,应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)分析肺组织中TGF-βRⅡ各亚型的表达。结果:1.光镜病理形态学观察(HE染色):肺纤维化造模成功,给予BLM后第1、3、7、14、28、35天纤维化程度逐渐明显。2.实时荧光定量PCR分析各组不同阶段肺组织中TGF-βRⅡ各亚型的表达变化:ActR-ⅡA和ActR-ⅡB在纤维化形成过程中表达较低,表达水平最高的阶段不到正常对照组的一倍,而TβR-Ⅱ在给予BLM后第一天即处于高表达水平,随后在第7天达到第一个高峰,继而逐渐下降至第28天表达水平为最低状态接近基线,随后又升高,到第35天仍处于高水平。AMHR-Ⅱ在给予BLM后第1天即开始升高,至第14天达到高峰,后逐渐下降,在第28天和第35天时降之基线附近。纤维化组TβR-Ⅱ、ActR-ⅡA、ActR-ⅡB和AMHR-Ⅱ同正常对照组比较,P<0.05,具有统计学意义。纤维化各组因子比较,仅TβR-Ⅱ因子与其他各因子相比,P<0.05,具有统计学意义,而其它各因子间的相互比较,P>0.05,没有统计学意义。结论:1.TβR-Ⅱ、ActR-ⅡA、ActR-ⅡB和AMHR-Ⅱ均参与肺纤维的形成过程。2.TβR-Ⅱ在早期炎症反应时期和纤维化形成后期均呈高表达水平,其升高的倍数最高达正常对照组的七倍。