禽流感病毒属于正粘病毒科单股负链RNA病毒,可感染禽类、哺乳类。在中国,低致病性禽流感流行主要是H9N2亚型,该病毒的流行给畜禽养殖业带来巨大的经济损失。目前,中国在禽流感临床防控中发现最为有效的预防方法和控制手段是疫苗接种。然而,最些年的研究表明,禽流感病毒在大面积免疫疫苗的环境下,为适应已免疫的宿主,其内部基因进行重组和突变。特别是,低致病H9N2病毒某些关键位点的突变,极易导致其逐步突破哺乳动物的屏障,使得其对哺乳动物的潜在威胁越来越大,由此可见对禽流感病毒的遗传进化分析尤为重要。本论文对湖南地区近4年分离的17个H9N2代表株的遗传进化情况进行系统分析,并筛选出候选疫苗株进行保护效果评价。选取近4年间的分离的17株H9N2代表株进行全基因测序,并绘制HA、NA基因片段构建进化树进行遗传分析。结果表明,这期间湖南地区流行的H9N2属于HK/Y280/97/like亚系,但与HK/Y280/97/like以及当地使用的疫苗株YBF003同源性低。许多抗原位点发生变化,特别是受体结合位点226位为赖氨酸（L）。在本研究中,基于H9N2病毒遗传进化分析,进一步分析其抗原性和生物学特性,筛选出H9N2疫苗候选株XKY46。2017年01月于湖南省地区养殖场及活禽市场分离,HA效价10⁹,EID₅₀为10^8.46,具有很好的繁殖能力,无传支混合感染,热稳定。免疫一次抗体水平能达到9以上,比商品化YBF003疫苗高2个滴度,整体保护率为93.3%。综上可知,XKY46是一个良好的候选疫苗株。本研究为评价XKY46毒株以不同方式灭活、不同佐剂用于灭活疫苗的免疫效果。分别采用不同浓度甲醛溶液、β-丙内酯对病毒灭活。对选取3种进口白油、2种国产白油和本实验室自主研制的相关物理生化特性进行测试,从而评价实验室自主研制的白油的性能。结果表明用β-丙内酯,4℃灭活24 h后的抗原,灭活方式优于其他方法。新佐剂疫在水中较容易扩散,并且反复冻融后分层情况不严重,动物免疫后,肌体产生抗体时间短于其他组,并且效价高;对动物免疫持续期长。综上可见β-丙内酯灭活方法以及新佐剂可用于H9N2亚型禽流感疫苗生产中。