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目的探讨WT1基因在急性白血病(AL)患者中的表达水平及在微小残留病(MRD)监测中的临床意义。方法1.采用实时定量RT-PCR方法检测104例AL患者及对照组19例非恶性血液病患者骨髓细胞WT1拷贝数及内参基因(ABL)拷贝数,以NQ比值=WT1基因拷贝数/ABL基因拷贝数计算基因表达水平。2、跟踪观察在化疗获得第1次缓解(CR1)后不接受或不能接受造血干细胞移植(HSCT)的28例患者1年,采用实时定量RT-PCR方法定期监测WT1mRNA表达水平变化,同时应用流式细胞术(FCM)的方法测定患者MRD水平变化,将残存的白血病细胞占骨髓单个核细胞总数的比值作为MRD的数值。结果1、对照组非白血病患者骨髓细胞WT1mRNA中位表达水平为0.008(0.001-0.019)。初治AML和ALL患者WT1mRNA中位表达水平分别为0.727和0.613,较对照组均显著升高(P值均<0.05)；而在初治AML和ALL患者之间WT1mRNA的中位表达水平无显著性差异。78例初治AML患者各亚型中M3患者WT1mRNA中位表达水平最高,达0.851；M5患者WT1mRNA中位表达水平最低,达0.331。各亚型之间WT1mRNA表达水平差异均无统计学意义。26例初治ALL患者不同亚型(B-ALL、T-ALL)之间WT1mRNA中位表达水平无显著性差异。86例初治AL(非APL)患者化疗后缓解率为52.3%,WT1mRNA表达水平≥0.500的患者CR率为43.1%,WT1mRNA表达水平<0.500的患者CR率为75.0%,两组之间CR率有显著性差异(P<0.05)。初治组与复发组WT1mRNA表达水平分别与完全缓解组比较差异均有统计学意义(P值均<0.01),初治组与复发组WT1mRNA表达水平分别与对照组比较差异均有统计学意义(P值均<0.01)而对照组与完全缓解组之间比较及初治与复发组之间比较差异无统计学意义,即初治AL患者WT1mRNA中位表达水平明显高于完全缓解组及对照组,复发时同样高于完全缓解组及对照组。2、对28例AL CR1患者同时进行了WT1mRNA表达水平与FCM测定MRD水平的跟踪,其中23例患者WT1mRNA表达水平与FCM测定MRD水平呈正相关,相关系数中位数为0.68(0.56-0.83),(P值均<0.05),另外5例患者WT1mRNA表达水平与FCM测定MRD水平无相关性。1年内16例血液学持续缓解患者中13例WT1mRNA表达水平始终在正常范围内波动,12例发生血液学复发的患者中9例复发前平均2-3个月WT1mRNA的表达水平明显上升,至少上升了1个对数级,这表明WT1mRNA表达水平在患者完全缓解状态下突然升高预示近期复发的可能性大。结论1、WT1基因在各种类型AL患者中均有较高表达水平,在非恶性血液病患者中低表达或不表达,且不同类型AL患者WT1基因表达水平有差异。WTl基因的表达水平与AL患者的化疗效果密切相关。2、实时定量RT-PCR法定量检测WT1基因表达水平可用于监测AL患者MRD,与FCM术测定MRD水平呈正相关,WTl基因表达水平在患者完全缓解状态下突然升高预示近期复发的可能性大。