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目的:通过观察清热化痰散结方及其清热、化痰、散结3个拆方对人肺鳞癌SK-MES细胞和小细胞肺癌NCI-H69细胞的增殖抑制和PI3K-Akt-m TOR信号转导通路蛋白表达的影响,研究清热化痰散结方治疗肺癌这两种细胞的机理,寻求有效的中医方药,从分子层面初步探讨中医中药对肺癌治疗的作用机制。方法:运用MTT法分别检测533味中药对人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69增殖抑制的作用,筛选出均能抑制两种细胞增殖的药物,根据《中药学》药物功效、正交试验设计结果和导师经验优选出最佳方剂;用倒置显微镜观察各方对人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69细胞形态的影响;运用流式细胞术检测各方对人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69细胞周期的影响;运用Western blot法分析各方对人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69 PI3K-Akt-m TOR信号转导通路中PI3K、Akt、m TOR蛋白表达的影响。结果:(1)筛选出5味对人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69增殖均有抑制作用的药物。(2)优选出最佳方剂清热化痰散结方。(3)清热化痰散结方及其拆方均能抑制人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69的增殖,细胞形态与正常组相比均有所改变。肺鳞癌SK-MES细胞:各方均漂有死细胞;清热方的细胞间接触松散,细胞皱缩;化痰方的细胞形态变小,细胞间隙变大;散结方的细胞较对照组偏小,部分细胞膜皱缩发泡且细胞透光度增高;全方的细胞间隙变大,细胞皱缩;小细胞肺癌NCI-H69细胞:清热、化痰、散结和全方对NCI-H69细胞均有抑制作用,细胞数量减少,细胞聚团生长变少,单个细胞存在现象较为普遍,死细胞较多,其中散结方的细胞偏小。(4)清热化痰散结方及其拆方均能抑制人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69的增殖,以全方作用最强,呈剂量依赖和时间依赖关系,对SK-MES细胞增殖抑制作用强弱依次为:全方﹥散结方﹥清热方﹥化痰方,对NCI-H69细胞增殖抑制作用强弱依次为:全方﹥清热方﹥散结方﹥化痰方。(5)清热化痰散结方及其拆方对人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69的细胞周期都有明显影响。SK-MES和NCI-H69细胞:清热化痰散结方及其拆方S期细胞比率明显增加,SK-MES细胞作用强弱依次为化痰方>清热方>全方>散结方,散结方不仅可以作用于S期,还可以作用于G2期;NCI-H69细胞:作用强弱依次为化痰方>清热方>散结方>全方,全方不仅可以作用于S期,还可以作用于G2期。(6)通过文献查阅得知人肺鳞癌SK-MES和小细胞肺癌NCI-H69中均有PI3K、Akt、m TOR蛋白表达,当其各自使用清热方、化痰方、散结方及全方IC50值的药物浓度作用时,发现各方对PI3K、Akt、m TOR蛋白均有不同程度的抑制作用,两种细胞m TOR和PI3K蛋白表达均显示各方效果强弱依次为:全方﹥散结方﹥清热方﹥化痰方;两种细胞Akt蛋白表达均显示各方效果强弱依次为:全方﹥清热方﹥散结方﹥化痰方。结论:(1)清热化痰散结方及其拆方均能抑制人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69的增殖。(2)清热化痰散结方及其拆方主要将人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69阻滞于S期从而抑制细胞增殖。(3)清热化痰散结方及其拆方均能抑制人肺癌细胞SK-MES和NCI-H69 PI3K、Akt、m TOR蛋白的表达,进而抑制人肺癌细胞的增殖。(4)在肺癌的病变中,热毒、痰浊、瘀结与PI3K-Akt-m TOR信号通路蛋白表达密切相关。