目的 观察肺癌细胞株和肺癌患者外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)Th1/Th2类细胞因子的状态;探讨中药黄芪(Astragalus,AG)和川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMPz)对肺癌Th1/Th2失衡状态的逆转作用。 方法 本课题分别进行了肺癌细胞株、肺癌患者PBMC体外培养实验和肺癌患者静脉用药试验三个部分的系统研究。1.肺癌细胞株:选择鳞癌L78、腺癌PG、小细胞肺癌SCL三种人肺癌细胞株培养体系。以IFN-γ、IL-2代表Th1类细胞因子,IL-4、IL-6、IL-10代表Th2类细胞因子,采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,检测三种肺癌细胞株经不同浓度的AG/TMPz培养前后Th1/Th2细胞因子的mRNA表达。每种肺癌细胞株的研究分5组:用药前组、AG组、TMPz组、AG+TMPz组、无药培养组。各加药组分别包括3种不同的浓度:AG组药物浓度分别为5%、10%、20%;TMPz组药物浓度分别为1μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml;AG+TMPz组药物浓度分别为AG和TMPz各自对应三种浓度的组合。2.肺癌患者PBMC体外实验(简称体外实验):选择确诊肺癌患者23例和健康志愿者19例,采用RT-PCR和酶联免疫吸附试验方法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),检测肺癌患者PBMC分别经不同浓度AG/TMPz作用前后,细胞及其培养上清液中Th1/Th2类细胞因子(同肺癌细胞株)的表达和分泌水平。本试验分5个组:用药前组、AG组、TMPz组、AG+TMPz组、无药培养组。各加药组分别包括2种不同的浓度:AG组药物浓度分别为10%、20%;TMPz组药物浓度分别为100μg/ml、1000μg/ml:AG+TMPz组药物浓度分别为AG和TMPz各自对应两种浓度的组合,