【摘 要】
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目的:Caveolin-1 shRNA(Cav-1 shRNA)慢病毒载体构建,进一步构建稳定低表达Cav-1的单克隆人脑微血管内皮细胞株,实时荧光定量PCR筛选抑制率最好的单克隆人脑微血管内皮细胞株。方法:(1)筛选出人Cav-1基因干扰序列。制备双链DNA oligo,利用基因重组技术克隆慢病毒表达载体pHBLV-U6-Scramble-ZsGreen-Puro,提取质粒并双酶切后行DNA测序
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目的:Caveolin-1 shRNA(Cav-1 shRNA)慢病毒载体构建,进一步构建稳定低表达Cav-1的单克隆人脑微血管内皮细胞株,实时荧光定量PCR筛选抑制率最好的单克隆人脑微血管内皮细胞株。方法:(1)筛选出人Cav-1基因干扰序列。制备双链DNA oligo,利用基因重组技术克隆慢病毒表达载体pHBLV-U6-Scramble-ZsGreen-Puro,提取质粒并双酶切后行DNA测序鉴定慢病毒载体。将慢病毒包装辅助质粒和制作的含Cav-1-shRNA的慢病毒载体共转染293T细胞,收集
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