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背景:脑胶质瘤（Brain Glioma,BG）是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,具有较高的致残性和致死率,患者术后易复发,5年存活率较低。近年来,肿瘤分子靶向治疗技术不断发展,逐渐成为治疗肿瘤的新型手段。对于BG而言,探索有效的且特异性强的分子标记物,研发以该分子标记物为靶向的治疗方案,成为大家关注的热点。补体因子I（Complement Factor I,CFI）是一种参与补体激活途径的补体系统抑制因子。在辅助因子的参与下,CFI能够裂解C3b和C4b,达到抑制机补体系统过度激活的免疫调节作用。近年来,CFI被发现异常表达于各种肿瘤组织中,但其在BG中的表达情况和临床预后的价值及其具体分子机制的研究尚不明确。本研究旨在分析CFI在脑胶质瘤病理组织样本中的具体表达情况和临床预后的价值,同时研究CFI在BG细胞系中的表达情况,并通过基因沉默技术在体外干扰BG细胞系中CFI的表达,以探究其对BG的具体作用和上下游的分子机制,为开发以CFI为靶点治疗BG提供理论依据和研究思路。方法:1、运用生物信息学分析（Bioinformatics Analysis,BIA）技术研究公开数据库中CFI在各类肿瘤组织,尤其是脑胶质瘤组织中的表达情况和临床预后的价值。通过购买BG病理组织芯片,利用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）技术分析CFI在脑胶质瘤病理组织样本中的表达情况,分析CFI的表达与BG患者临床预后的价值之间的关系。通过收集10例脑组织标本（包含3例正常脑组织标本和7例BG标本）,采用蛋白免疫印迹（Western Blot,WB）技术和实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应（Reverse Transcription quantitative real-time Polymerase Chain Reaction,RT-q PCR）技术分析CFI在正常脑组织和BG组织中RNA水平和蛋白质水平上的表达差异。2、通过体外培养人类正常星形胶质细胞（Normal Human Astrocytes,NHA）和5种胶质瘤细胞系细胞,结合WB和RT-q PCR技术分析CFI在NHA和BG细胞系中的表达特征。根据CFI在胶质瘤各细胞系中的表达情况,选出CFI表达量最高的两种BG细胞（A172和U251）作为sh CFI慢病毒的感染目标细胞,进行慢病毒感染效率和CFI干扰效率验证,并对干扰组和对照组的BG细胞分别进行Ed U增殖、细胞克隆形成、细胞划痕和Transwell等实验研究,分析CFI表达水平下调对BG细胞增殖、迁移和侵袭的能力的影响。3、利用蛋白质组学研究结合质谱分析CFI表达量敲低前后差异表达的蛋白质,结合GO分析和KEGG信号通路分析,探究CFI下游的分子机制和相关信号通路。利用WB技术结合核内蛋白提取技术对生信分析富集到的NF（?）B信号通路进行验证分析,分析CFI是否通过激活NF（?）B信号通路促进脑胶质瘤的进展。4、利用中国脑胶质瘤图谱数据库进行生信分析,得到与CFI表达相关的上游调控基因FCGR3A。分析公开数据库中FCGR3A在BG患者中的表达情况及其与BG患者临床预后的关系,并在脑胶质瘤细胞系中验证CFI的表达情况。利用si RNA技术沉默FCGR3A的表达,并分析BG细胞的增殖、迁移和侵袭能力的改变。最后通过WB和Ed U增殖、细胞克隆形成、细胞划痕和Transwell等实验分析FCGR3A是否通过调控CFI的表达发挥促癌作用。结果:1、CFI在大部分恶性肿瘤中均呈高表达特点。利用生信分析研究CFI在BG中表达情况,发现CFI在高级别胶质瘤中的表达量显著高于低级别胶质瘤,CFI的表达量与BG患者的年龄和WHO病理分级呈正相关,与BG患者的临床预后呈负相关。对100例BG患者病理切片进行IHC分析,同样证实上述公开数据库中生信分析的结果。对10例临床脑组织样本进行WB和RT-q PCR分析进一步验证了上述结果。2、与NHA细胞相比,BG细胞系中CFI的表达量显著上调,其中A172细胞表达量最高,U251细胞次之,表达量最低的BG细胞系为LN229细胞。选取表达量最高的A172和U251细胞作为CFI基因沉默实验对象,通过WB实验筛选出沉默表达CFI的细胞株用于后续肿瘤细胞表型验证。对比CFI干扰组和空白对照组,发现CFI干扰组BG细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显下降。3、对CFI干扰组和空白对照组的细胞样本进行蛋白质组学分析,得到差异表达蛋白325个,通过BIA技术富集到NF-（?）B信号通路。WB实验验证下调CFI表达后,进入核内的NF-（?）B p65蛋白总量减少,该通路中关键蛋白NF-（?）B p65、I（?）B以及IKKα、IKKβ、IKKαβ无明显改变,但磷酸化的蛋白p-NF-（?）B、p-I（?）B和p-IKKαβ的表达量明显下降。4、公开数据库结合BIA发现CFI的表达与FCGR3A的表达呈正相关,FCGR3A高表达于绝大多数恶性肿瘤组织中,与CFI的表达特征相似,FCGR3A在病理级别更高的BG中表达量更高,其表达量与患者的临床预后呈负相关。FCGR3A在BG细胞系中的表达量明显高于NHA细胞,A172和U251中FCGR3A的表达量最高,U87MG中表达量最低。体外干扰FCGR3A的表达后,发现BG细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降。WB实验验证FCGR3A表达下调后,CFI蛋白的表达量随之下降;而上调FCGR3A的表达量,同样上调CFI蛋白。WB和RT-q PCR实验验证FCGR3A是调控CFI表达的上游基因,通过肿瘤细胞表型实验发现,FCGR3A通过上调CFI的表达发挥促癌作用。结论:CFI在脑胶质瘤中异常高表达,其上调的表达量与脑胶质瘤患者的年龄和WHO病理级别呈正相关,与患者的临床预后呈负相关。CFI通过促进脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力发挥促癌作用。CFI通过其下游的NF-（?）B信号通路发挥促进脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的作用。与CFI相似,FCGR3A在脑胶质瘤中异常高表达,其上调的表达量与胶质瘤患者的病理分级呈正相关,与患者的预后呈负相关。FCGR3A同样可以促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。CFI的表达量与FCGR3A的表达量明显正向相关,CFI的表达受FCGR3A的调控,FCGR3A作为CFI的上游基因,通过调控CFI的表达发挥促进胶质瘤进展的作用。