淫羊藿苷对精索静脉曲张模型大鼠附睾病变的影响

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背景和目的:精索静脉曲张是指精索内蔓状静脉丛异常的迂曲和扩张,是引起男性不育的最常见原因。精索静脉曲张在成年男性人群中的发病率为15%-20%,但它在男性不育患者中发病率显著增加到25%-40%。精索静脉曲张是一种渐进性疾病并常发生于青春期,绝大多数发生于左侧。临床研究表明精索静脉曲张术后部分患者生育力并没有改善,因此,精索静脉曲张手术治疗的效果尚存有争议。目前中医中药治疗精索静脉曲张取得了一定的进展,一些中医药可缓解其症状,提高治疗后怀孕率,使部分患者免受手术之苦。淫羊藿是传统的补肾壮阳中药,是中医中药治疗生殖内分泌疾病过程中常用的药物之一。淫羊藿苷(Icariin,ICA)是其主要的活性成分,属于黄酮类化合物,对内分泌、免疫、生殖系统有明显的调节作用。实验研究发现,淫羊藿可使青春期前大鼠附睾及精囊腺重量增加,提高黄体生成素水平,同时可促进大鼠离体间质细胞分泌睾酮,因此,淫羊藿苷对男性生殖系统及生殖内分泌功能起促进作用。从解剖结构来看,睾丸和附睾的大部分血供是相同的,且两者均在阴囊内,因此,在精索静脉曲张引起睾丸病变的同时,附睾可能同时也受累,进而发生一系列病理改变。除了上述理论基础,现已有文献报道,精索静脉曲张确可导致大鼠附睾组织结构和功能的损害。可以初步推断,附睾的病理改变可能是精索静脉曲张导致不育的一个重要因素。目前,关于淫羊藿苷对精索静脉曲张所致附睾病变的影响,尚无相关研究报道。有鉴于此,本实验首先建立实验性精索静脉曲张大鼠模型,并以淫羊藿苷对其进行治疗,通过检测治疗后大鼠附睾氧化应激水平、结构、功能和细胞凋亡情况,来探讨淫羊藿苷对精索静脉曲张模型大鼠附睾病变的影响。方法:40只青春期雄性SD大鼠随机分为:假手术对照组(10只)、实验性精索静脉曲张(EV)组(15只)、淫羊藿苷(ICA)治疗组(15只)。EV组和ICA治疗组大鼠进行实验性精索静脉曲张模型的制备。EV模型的建立采用左肾静脉部分结扎法。假手术对照组大鼠手术时只行左肾静脉分离而不结扎。假手术对照组、EV组每天给予生理盐水2m1灌胃,ICA治疗组按100mg/kg.d剂量行淫羊蕾苷灌胃给药。每天一次,连续给药6周。6周后,分别处死各组大鼠;取出各大鼠左侧附睾进行称重;比色法测定附睾组织内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量;采用5-甲基苯二酚法测定唾液酸含量;用DTNB(5,5-二巯基-2,2-二硝基苯甲酸)方法检测附睾匀浆中肉毒碱含量;HE染色观察附睾显微结构变化;电镜观察附睾超微结构变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记(TUNEL)法检测附睾上皮细胞凋亡。结果:EV组大鼠附睾重量显著低于假手术对照组(P<0.01),而ICA治疗组附睾重量显著高于EV组(P<0.01)。与假手术对照组比较,EV组大鼠附睾组织SOD活力和GSH-Px活力显著下降(P<0.01), MDA含量显著升高(P<0.01);而ICA治疗组能显著提高精索静脉曲张模型大鼠附睾组织SOD活力和GSH-Px活力,降低MDA含量,与EV组比较差异有显著性(P<0.01)。和假手术对照组比较,EV组附睾显微结构及超微结构均出现了不同程度的病理损害,光镜下可见附睾上皮细胞排列不规则,胞浆出现空泡化变性,管腔内正常精子明显减少,间质水肿,小血管淤血扩张;电镜下可见主细胞内溶酶体增多、体积增大,胞质内空泡明显增多,线粒体肿胀、嵴变模糊,基膜增厚。和EV组比较,ICA治疗组附睾上皮显微结构及超微结构损害明显较轻。EV组大鼠附睾上皮细胞AI显著高于假手术对照组(P<0.01);而ICA治疗组附睾上皮细胞AI显著低于EV组(P<0.01)。EV组大鼠附睾组织唾液酸和肉毒碱含量分别显著低于假手术对照组(P<0.01);而ICA治疗组附睾组织唾液酸和肉毒碱含量分别显著高于EV组(P<0.01)。结论:本实验成功地制备了实验性大鼠静脉曲张大鼠模型;本实验结果显示精索静脉曲张可引起附睾组织发生氧化应激,而淫羊藿苷可抑制其所致的氧化应激;精索静脉曲张可引起附睾组织结构和功能的损害,而淫羊藿苷可修复这些损害;精索静脉曲张可诱导附睾组织发生细胞凋亡,而淫羊藿苷可减少其所致的细胞凋亡。总之,我们的实验初步证实了淫羊藿苷可拮抗精索静脉曲张所致的附睾损害,为淫羊藿苷治疗精索静脉曲张所致不育提供了依据。
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