CGRP在小鼠真菌性角膜炎中的抑炎作用

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oxen777
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:分析降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus,AF)感染所致的真菌性角膜炎中发挥的作用及涉及机制。
  方法:1.准备C57BL/6和BALB/c小鼠烟曲霉菌性角膜炎1、3、5天模型,通过Real-time PCR检测CGRP的mRNA水甲。2.将8周C57BL/6小鼠随机分为单纯烟曲霉菌感染组与外源性CGRP预处理组,感染前一天给予结膜下注射外源性CGRP(O.1μg/5μl和1μg/5μl)预处理,建立3天烟曲霉菌性角膜炎小鼠模型,在裂隙灯下拍摄小鼠角膜照片并记录临床评分。采用Real-time PCR和Western Blot分别检测小鼠角膜组织中炎症因子的表达。将8周BALB/c小鼠随机分为单纯烟曲霉菌感染组与CGRP受体阻断剂CGRP8-37预处理组,感染前一天给予结膜下注射CGRP8-37(0.2μg/5μl),建立3天烟曲霉菌性角膜炎小鼠模型,通过Real-time PCR与Western Blot分别检测小鼠角膜组织中炎症因子的表达。3.利用不同浓度(10ng/ml和30ng/ml)的外源性CGRP以及不同浓度(100ng/ml和300ng/ml)CGRP8-37预处理小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞30min,烟曲霉菌灭活菌丝与小鼠巨噬细胞共同培育12h,均与感染对照组的细胞进行比较,采用Real-timePCR和Western Blot分别检测小鼠巨噬细胞的NLRP3和IL-1β的mRNA和蛋白水甲。
  结果:1.BALB/c鼠感染后神经肽CGRP表达比C57BU6多。2.C57BL/6小鼠的外源性CGRP预处理组与单纯感染组相比,小鼠角膜严重程度明显减轻且临床评分降低,炎症因子IL-1β和MIP-2的mRNA水平明显降低,TNF-α的mRNA无明显改变:IL-1β的蛋白表达量明显减少。BALB/c小鼠的CGRP8-37预处理组与单纯感染组相比,炎症因子IL-1β、MIP-2和IL-6的mRNA水平增加,同样TNF-α的mRNA无明显变化:其中IL-1β的蛋白表达量有较为显著的增加。3.与感染对照组的小鼠巨噬细胞相比,外源性CGRP预处理组的细胞NLRP3及炎症因子IL-1β的mRNA和蛋白的表达明显降低:而CGRP8-37预处理小鼠巨噬细胞之后与单纯烟曲霉菌刺激组对比,NLRP3和IL-1β的mRNA和蛋白水平均增加。
  结论:抵抗性小鼠BALB/c角膜组织相比易感性C57BL/6小鼠感染后表达更高CGRP表明CGRP抗炎保护作用。CGRP通过抑制小鼠巨噬细胞NLRP3和炎症因子IL-1β的mRNA和蛋白表达下调小鼠烟曲霉菌性角膜炎炎症反应。
其他文献
报纸
期刊
学位
期刊
学位
会议
报纸
期刊
期刊
期刊