旋毛虫抗肿瘤作用的实验研究

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旋毛虫成虫及新生幼虫可溶性提取物的主要成分是磷酰胆碱、多糖和多种蛋白质等物质,本实验对活体旋毛虫体内抗肿瘤及其提取物体内外抑制肿瘤细胞的生长、诱导肿瘤细胞凋亡及其分子生物学机制等方面进行了深入探索,为研究与开发新型的抗肿瘤制剂提供科学依据。采用小鼠移植性H22、MFC和S180肿瘤模型,观察活体旋毛虫及其提取物对小鼠肿瘤重量的影响发现,实体瘤的体内抑瘤率均超过60%,抑瘤作用较强。提取物各个剂量作用后的平均瘤重与对照组相比,差异显著。用MTT法分别检测提取物对肿瘤细胞的抑制作用,结果发现旋毛虫提取物在体外对肿瘤细胞H22、MFC、S180、K562、H7402均有直接杀伤作用,其中对人白血病细胞株K562的杀伤作用最强,对正常人肝脏细胞无明显毒性作用。同时姬姆萨染色法观察到经提取物作用后的肿瘤细胞呈典型的凋亡形态。运用DNA Ladder、TUNEL、流式细胞术对体外培养的人白血病K562细胞和人肝癌H7402细胞进行凋亡分析;荧光免疫染色法观察旋毛虫提取物对细胞凋亡相关调节基因caspase-3、p53和Bax表达的影响。结果发现,提取物能够明显诱导K562和H7402细胞发生凋亡,坏死率较低,caspase-3、p53和Bax蛋白表达增加。说明提取物通过诱导肿瘤细胞发生凋亡而杀死肿瘤细胞。通过BioCarta数据库分析,旋毛虫提取物可能通过p53→Bax→caspase-3途径促使肿瘤细胞发生凋亡。
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