IMS-PCR检测番茄细菌性斑点病种子带菌研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 15次 | 上传用户:twobadgirl
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
番茄细菌性斑点病是一种严重影响番茄产量和品质的病害。这种病害由丁香假单胞杆菌番茄致病变种(PST)引起。种子带菌是田间主要初侵染源之一,也是病害从一年传染到下一年的原因,还是病害从一个地区传染到其它地区的原因。因此制定快速可靠灵敏的种子带菌检测方案尤为重要。 本研究在中国农科院植保所国家重点实验室进行,所做的工作在国内是首次进行的。采用两种方法制备得到两种抗原,分别对应两种注射方法,得到三种血清:抗PST全菌体血清、抗PST2844-87血清和抗PST18血清。用试管凝集法测定了所得血清的效价:抗全菌体血清效价为640,另外两种血清效价为1280以上。用ELISA检测所获抗体的专一性,三种血清的专一性基本相近,抗18血清交叉反应最少,抗全菌体血清交叉反应在其次,假阳性反应最多的是抗87血清。 提取了供试74种细菌的基因组DNA,确定了检测PST的PCR条件;得到能够扩增两个特异基因片段的引物,引物对p1、p2和引物对p3、p4。引物p3、p4扩增的基因特异性较强,可以供检测用,而引物p1、p2所扩增的基因片段的特异性较弱,可作辅助检测用。制备得到了具有磁心的琼脂糖微球载体,保存于4℃。进行了抗血清IgG的粗提。 将上述实验结果应用于种子带菌检测。在实验中设定不同梯度的人工接菌浓度,其中ELISA的检出临界值是1%。PCR的检出值是0.1%。
其他文献
Hafnium oxide thin films doped with different concentrations of yttrium are prepared on Si (100) substrates at room temperature using a reactive magnetron sputt
桃起源于中国,有丰富的种质资源和育种经验,但在基础研究方面和国外有很大的差距,这在很大程度上制约了资源的利用和开发,也制约了品种选育工作的速度.欧洲、美国和日本都相
Reducing the contact resistance without degrading the mobility property is crucial to achieve high-performance graphene field effect transistors. Also, the idea
西瓜[citrullus lanatus(th.)M]为葫芦科西瓜属植物,原产于非洲热带草原,是一种世界性园艺作物。西瓜杂种优势的利用,推动了西瓜产业的发展。在优势育种过程中,亲本的选择和选
A mobile Rayleigh Doppler lidar based on double-edge technique is implemented for simultaneously observing wind and temperature at heights of 15 km-60 km away f
In this work,the total ionizing dose (TID) effect on 130 nm partially depleted (PD) silicon-on-insulator (SOI) static random access memory (SRAM) cell stability