因创伤、肿瘤、炎症等导致的软骨损伤在临床上较为常见,且涉及软骨损伤性疾病的发病率还会因为我国人口老龄化问题的加剧而进一步升高,从而严重影响人们的生活质量并增加社会负担。软骨因为自身的结构和功能特点,导致其受损后再生能力很差,因此这类患者常常需要接受各类保守治疗或手术治疗甚至无法治疗而终生残疾。但是传统的治疗方法都存在着不可忽略的缺点,如组织移植术中的自体移植需要开辟第二术区造成二次创伤,异体移植会引起免疫排斥反应,且供体来源受限;骨髓刺激术所修复的组织性能较正常软骨组织差,且远期效果不佳。组织工程技术的出现为软骨损伤的修复带来了新的希望。经典的组织工程技术具备三个基本要素,即种子细胞、生物支架、生物因子。采用相关工艺制备成具有特定形状、结构和性能的组织工程支架,再将一定数量的种子细胞接种到支架上,在生物因子的程序性刺激下,细胞按照预定的程序合成分泌相应的细胞外基质,并以生物支架为模板组装成特定的结构,同时生物支架逐渐降解为新生组织提供空间,从而最终修复受损组织和器官。在本实验中,我们拟评估采用静电纺丝技术制备的左旋聚乳酸/丝素蛋白复合纳米纤维支架在软骨组织工程中的应用潜能。首先采用扫描电子显微镜来观察支架的表面形貌,并结合电镜图片来分析其直径大小及分布范围;通过接触角和溶胀比来评价其亲水性能;并通过万能试验机来评价其力学性能。然后以软骨细胞为种子细胞接种到支架上,通过扫描电子显微镜、激光共聚焦显微镜来观察软骨细胞在支架上的粘附及形态;通过生化定量实验和组织化学染色来检测软骨细胞在支架上的增殖及合成分泌软骨细胞外基质的能力;最后通过实时定量PCR技术来检测软骨细胞在支架上表达软骨特异性基因的水平,以及软骨细胞在此支架上维持表型稳定的能力或是发生去分化及肥大的程度。通过上述一系列实验,结果表明通过静电纺丝技术制备的左旋聚乳酸/丝素蛋白复合纳米纤维支架,具有良好的表面形貌及三维网络多孔结构,具备良好的亲水性能,软骨细胞能够在支架上很好的粘附、增殖及分泌软骨细胞外基质,并能够高水平表达软骨特异性基因,并能够使软骨细胞维持其表型相对稳定不变,软骨细胞发生去分化及肥大的程度相对较低。通过本实验,证明了静电纺丝左旋聚乳酸/丝素蛋白复合纳米纤维支架在软骨组织工程中具有潜在的应用价值,并为下一步动物实验及后期临床转化应用奠定了基础。