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目的:本文通过动物实验探究对长期给予齐墩果酸诱导胆汁淤积肝损伤中FXR、Nrf2信号通路对胆红素相关通路基因的调控作用,为阐明齐墩果酸肝毒性机制提供依据。方法:（1）分别选雄性野生型小鼠（wildtype,WT）、雄性FXR基因敲除小鼠（FXR-/-）和雄性Nrf2基因敲除小鼠（Nrf2-/-）各30只,随机分为空白对照组、低剂量组和高剂量组,各10只。空白对照组:口服灌胃小鼠玉米油;低剂量组（齐墩果酸,49.32 mg·kg-1）混悬液;高剂量组（齐墩果酸,147.96 mg·kg-1）混悬液,每日1次,连续30 d进行给药处理;末次给药24 h后摘眼眶取血和肝脏组织于-80℃冰箱备用。检测血清生化指标ALT、ALP、TBIL、DBIL含量,评估小鼠肝功能的变化。利用苏木精-伊红染色（HE染色）、马松染色（Masson染色）在显微镜下观察小鼠肝脏病理形态学的改变。RT-PCR方法检测各实验组小鼠肝脏中fxr、nrf2、ho-1、oatp1b2、mrp2、bsep、mrp3和ugt1a1的基因转录水平。Western Blot方法检测各实验组小鼠肝脏中FXR、Nrf2、HO-1、MRP2和BSEP的蛋白表达。（2）分别将雄性野生型小鼠和MRP2激动剂磺胺硝苯（Sulfanitran）处理的小鼠各24只,按体重分别随机分为空白对照组、低剂量组和高剂量组,每组8只。正常组:口服灌胃小鼠玉米油;低剂量（齐墩果酸,147.96 mg·kg-1）混悬液;高剂量组（齐墩果酸,295.92 mg·kg-1）混悬液,每日1次,连续4 d进行给药处理来建立动物模型,检测小鼠肝功能指标。将雄性野生型小鼠和MRP2抑制剂MK-571处理的小鼠各24只,按体重分别随机分为空白对照组、低剂量组和高剂量组,每组8只。正常组:口服灌胃小鼠玉米油;低剂量（齐墩果酸,147.96 mg·kg-1）混悬液;高剂量组（齐墩果酸,295.92 mg·kg-1）混悬液,每日1次,连续4 d进行给药处理来建立动物模型,检测小鼠肝功能指标。结果:（1）连续给药30天后,WT小鼠中,与空白组比较,血清中ALT、ALP、TBIL、DBIL随着给药剂量增加而升高（P﹤0.05）,并且显著增加小鼠肝脏胆红素水平,升高约60倍。此外,H＆E和Masson染色实验表明,齐墩果酸能够显著增加肝细胞坏死,炎性细胞浸润以及胶原纤维增生,这表明齐墩果酸能够促进血清和肝脏的胆红素增加,进一步诱发肝损伤;FXR-/-小鼠中,与空白组比较,低剂量组和高剂量组血清中ALT、ALP、TBIL、DBIL含量升高（P﹤0.05）,肝脏病理无明显变化;Nrf2-/-小鼠中,与空白组比较,低剂量组和高剂量组血清中ALT、ALP、TBIL、DBIL含量升高（P﹤0.05）,肝脏病理提示炎性细胞浸润;相对于WT小鼠,FXR-/-和Nrf2-/-小鼠血清中ALT、ALP、TBIL、DBIL含量减少,肝脏胆红素含量减少,肝脏损伤降低。基因分析显示,与空白组比较,WT小鼠给药后能够显著降低小鼠肝脏中fxr、ugt1a1、oatp1b2、mrp2和bsep的基因转录水平,增加nrf2、mrp3和ho-1的基因转录水平。蛋白结果显示,WT小鼠肝组织中核受体FXR和外排转运体MRP2、BSEP的表达水平显著降低,Nrf2和HO-1的表达显著降低。相比之下,FXR-/-和Nrf2-/-小鼠显著增加胆红素代谢酶ugt1a1、摄取转运体oatp1b1、外排转运体mrp2、bsep的基因转录水平,而ho-1、mrp3基因转录水平无明显变化。进一步蛋白结果提示,与WT小鼠相比,FXR-/-和Nrf2-/-小鼠肝组织中胆红素合成限速酶HO-1、外排转运体MRP2、BSEP的表达水平显著增加。说明连续30 d给予齐墩果酸诱导的肝损伤可能是调控胆红素合成与排泄造成。（2）连续给药4天后,WT小鼠中,与空白组比较,血清中ALT、ALP、TBIL、DBIL随着给药剂量增加而升高（P﹤0.05）;与WT小鼠相比,经过MRP2激动剂磺胺硝苯（Sulfanitran）处理的小鼠中,血清中ALT、ALP、TBIL、DBIL含量减少,肝脏病理提示损伤减轻;经过MRP2抑制剂MK-571处理的小鼠中,血清中ALT、ALP、TBIL、DBIL含量增加,肝脏病理提示损伤加重,结合分析说明肝细胞可能通过调节或干扰外排转运体来影响齐墩果酸对肝细胞的损伤。结论:1.齐墩果酸连续小剂量给予小鼠造成不同程度肝损伤,提示可能是通过下调FXR蛋白表达,使下游MRP2蛋白表达降低,阻滞胆红素通过MRP2外排或诱导Nrf2过表达,上调胆红素限速酶HO-1表达,促进胆红素生成,上调转运体mrp3基因转录,血液里胆红素含量增加,使小鼠体内胆红素蓄积,产生肝细胞毒性,致肝损伤增加;2.FXR基因敲除后,外排转运体MRP2无显著性变化,胆红素代谢与外排无显著影响,可能通过促进胆红素的代谢与外排,减少胆红素的体内蓄积,使小鼠肝损伤减轻;3.Nrf2基因敲除后,胆红素合成限速酶HO-1无显著性变化,胆红素合成无显著变化,可能通过减少胆红素的生成,减少胆红素的体内蓄积,使小鼠肝损伤减轻,该研究为进一步齐墩果酸所致肝毒性机制提供了一定基础。