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己烯雌酚(diethylstibestrol，DES)是一种人工合成的雌激素，在促进动物蛋白质的合成代谢、提高动物日增重和减少脂肪等方面效果明显，因此一直被作为一种动物生长促进剂用于畜禽以及水产品养殖中。国际癌症研究机构(IARC)研究发现，DES是一种致癌物质，能够在动物源性食品如肝脏、肌肉、蛋、奶中残留，并通过食物链危害人体健康。因此世界各国均规定食品动物养殖中不得以任何途径和方式使用DES，养殖动物及动物性食品中不得检出DES。
DES残留免疫分析是DES应用监控的一种重要手段，本文通过DES人工抗原的制备和鉴定、抗DES多克隆和单克隆抗体的制备和鉴定、DES酶标抗原合成以及酶免疫检测DES方法的建立等研究，旨在研制DES酶免疫检测试剂盒。
对己烯雌酚进行了结构修饰，用有机合成方法合成了DES单羧甲基醚，并通过红外、质谱和核磁共振氢谱鉴定合成成功；通过混合酸酐法和碳二亚胺法分别将DES单羧甲基醚与大分子蛋白质载体牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)偶联，合成了四种人工抗原，并通过紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定偶联成功，其中BSA与DES的偶联率约为1∶30，OVA与DES的偶联率为1∶18。
用混合酸酐法合成的BSA-DES免疫4只家兔，用混合酸酐法合成的OVA-DES和碳二亚胺法合成的OVA-DES免疫两组小鼠，获得了3种抗血清，选用不同的包被原，通过间接ELISA和间接阻断ELISA法对3种抗血清进行了鉴定，兔血清抗体效价在1∶10000以上，小鼠血清抗体效价在1∶8000以上，三种抗血清都能和DES特异性结合，同时建立了ELISA检测方法。
选用混合酸酐法合成的BSA-DES免疫Balb/c小鼠，用碳二亚胺法合成的OVA-DES做包被检测原，间接ELISA检测小鼠血清效价均在1∶1×105以上，选择其中效价最高的两只小鼠脾细胞，在PEG的作用下与SP2/0瘤细胞融合，通过间接ELISA法检测了单抗杂交瘤细胞培养上清中的抗体效价达1∶400以上，同时建立了DES残留检测的酶免疫检测方法，其中检测限达0.2μg/Kg。
用碳二亚胺法合成了酶标抗原HRP-DES，通过ELISA法证明了HRP-DES的正确合成。同时，建立了固相抗体竞争ELISA法检测DES残留，并绘制了检测曲线。
本研究首先将DES衍生成DES单羧甲基醚，通过两种偶联方法和两种载体合成了四种不同的人工抗原，通过兔子和小鼠的免疫试验，成功制备了高效价特异性DES抗血清和单克隆抗体，建立了DES残留检测的竞争ELISA方法，同时成功制备了HRP-DES，为组装DES酶免疫检测试剂盒奠定基础。