茼蒿(Chrysanthemum coronarium L.)是一种菊科(Compositae)茼蒿属(Chrysanthemum)药食两用植物。茎叶可食用,具有调理脾胃、降压补脑作用。茼蒿籽为植物学上的瘦果,有棱,褐色,千粒重为1.5~2 g。化学成分研究结果表明,茼蒿中含有多种类型化合物,例如黄酮、酚酸、生物碱、杂环化合物、植物甾醇和挥发油等。其中黄酮和酚酸类物质是茼蒿提取物中的主要成分,这两类物质存在菊科植物中分布较广泛。包括镇咳祛痰、植物化感作用、杀线虫、抗肿瘤、抗氧化和清除自由基、护肝和抗菌等生物活性在茼蒿提取物中均表现明显。茼蒿发挥植物化感作用和抗氧化作用的物质基础主要是黄酮和酚酸类成分,目前对于茼蒿茎叶成分研究已有报道,而茼蒿籽黄酮成分研究较少。本课题研究内容主要包括以下四部分:(1)利用微波辅助提取茼蒿籽中的黄酮类化合物,在单因素试验的基础上,通过二次回归正交旋转组合设计建立了数学模型,得出了提取茼蒿籽黄酮的最佳工艺条件:乙醇浓度68%、液料比25:1、温度72℃、微波功率500 W和微波时间7 min。在此条件下茼蒿籽黄酮的提取率为3.15%。(2)通过绘制D101型大孔树脂静态吸附动力学曲线,得到其对茼蒿籽黄酮类化合物的吸附量为25.5 mg/g。选取纯化条件样品液浓度1.0 mg/mL上样液p H=4、上样吸附流速2 BV/h、洗脱液为70%乙醇溶液,体积为3 BV。制备色谱单次上样量为15mL(即含150 mg粗黄酮),500 mg茼蒿籽粗黄酮的纯化约80分钟完成,并且在规定的色谱条件下分离出了四个组分。结果表明,制备色谱快速纯化系统能够将茼蒿籽总黄酮进一步分离,并且各组分纯度均有所提高。(3)结合高效液相色谱与质谱联用技术和液相色谱-飞行时间质谱串联两种方式对茼蒿籽中的黄酮类化合物进行了定性与定量分析,总共鉴别出11种化合物,其中8种对照标准品,确定分别为奎宁酸(95.0?g/g)、新绿原酸(145.5?g/g)、绿原酸(1693.0?g/g)、咖啡酸(144.5?g/g)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸(1027.0?g/g)、1,3-二咖啡酰基奎宁酸(1378.5?g/g)、牡荆素(145.0?g/g)和芹菜素-7-葡萄糖苷(184.0?g/g),另外3种根据二级碎片离子并参考相关文献,推断为5-阿魏酰奎宁酸(91.0?g/g)、DCQA isomer1(1031.5?g/g)和DCQA isomer2(51.0?g/g)。(4)通过化学法和细胞模型法对茼蒿籽黄酮的抗氧化活性进行评价。在总抗氧化能力、羟自由基清除能力、DPPH自由基清除能力和脂质过氧化体系中的抗氧化能力方面均表现出良好的效果,尤其是清除羟自由基能力强于抗坏血酸、个别组分在脂质过氧化体系中的抗氧化能力也强于抗坏血酸。在细胞模型抗氧化能力中,茼蒿籽黄酮对RAW264.7小鼠巨噬细胞在1.0-500.0?g/mL浓度内未表现出毒性,且能够有效降低细胞内活性氧的存在。