杨树LRR-RLK基因家族的表达分析与遗传转化研究

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陆生植物中富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶(Leucine-rich repeat receptor-like protein kinase,LRR-RLKs)家族是受体蛋白激酶家族中最大的亚家族,调控植物的生长发育、对抗病原菌、激素调控等过程。目前,对一些在细胞与细胞之间的交流中扮演着重要角色的LRR-RLKs基因已经有了相关的报道,但是仍有很多的LRR-RLKs基因其功能还没有被明确。本研究首先利用生物信息学的手段,得到了在维管组织中特异性表达的11个基因。随后构建了相应基因的cDNA过量表达载体,并利用农杆菌介导的遗传转化方法把这11个基因的过量表达载体转入野生型杨树INRA717 1-B4中,每个基因均挑选出10个以上的阳性转化子。并对每一个基因所得到的阳性转化子进行半定量分析及实时定量分析,挑选出表达量较高的前3名植株并移栽。本文还对移栽10周左右的转基因杨树植株进行了组织切片染色分析,并分析了个别转基因杨树苗的木质素含量。上述实验中,我们发现,其中的一个PtLRR-RLK2基因,在过量表达这个基因的杨树成熟的茎中,木质素的含量有所增加,这就间接的说明这个基因,以及包括在杨树中与拟南芥At PXY/TDR基因同源的那些基因,可能在植物次生细胞壁的发育过程中起着信号传导的作用。在杨树中过量表达PtLRR-RLK2基因除了引起木质素含量的适当增加外,PtLRR-RLK2基因的过量表达也通过降低植株的高度和直径而使整个植株的生长和发育受到影响。
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