单胺氧化酶(MAO)是一种膜结合线粒体酶,在多巴胺氧化代谢中起重要作用。根据其对底物或抑制剂结合的特异性、细胞分布、免疫特异性等特性分为A和B两种形式。它与人体的很多精神性疾病以及健康有着密切的关系,譬如帕金森症、阿尔之海默症、精神分裂症和攻击性行为及癌症等。因此,MAO作为新药物的靶标越来越受到广泛的关注和研究。目前有多种方法检测单胺氧化酶的活性:分光光度法、放射性法、高效液相法以及荧光探针法等。分光光度法、放射性法、高效液相法等都不适合高通量的筛选;而荧光探针具有很高的灵敏度和专一性,并且样品不需要复杂的提纯,因此荧光探针法被广泛应用于生物医学和生物学。本论文首先根据单胺氧化酶的反应机理成功设计和合成了一个探针:4-甲基-7-(3-氨基丙基)-香豆素。该探针并无荧光,但经与单胺氧化酶作用,3-氨基丙基转化为醛,接着发生消除反应后,生成了具有强烈荧光性能的4-甲基-7-羟基香豆素。因此通过检测荧光的变化就可检测MAO的活性。接着利用从人胎盘和牛肝中提取的MAOA和MAOB粗酶,系统的研究了探针的检测条件:2h,温度为37℃,硼酸缓冲液pH=8.4,最后对他们的动力学常数进行了测定。结果为MAOA:K_m=16.04±0.05μmol/L,V_max=0.72±0.01nmol/min/mg;MAOB:K_m=12.25±0.05μmol/L,V_max,=2.57±0.02nmol/min/mg。最后,本论文对探针进行了简单的应用,包括酶提取和人血清的检测。总之,本论文所设计的探针是非常高效和灵敏的,同时它对MAOA和MAOB有选择性。