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为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白（rChIFN-α-Linker-ChIL-2，重组融合蛋白）在鸡体外的生物学活性及在鸡体内的最佳使用剂量，从而为重组融合蛋白作为抗病毒制剂和免疫增强剂在临床上推广应用提供科学依据，本研究采用夹心ELISA方法分别检测重组融合蛋白与抗rChIFN-和rChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性；采用50%细胞病变抑制法进行了重组融合蛋白和rChIFN-蛋白对照在CEF细胞上抗水泡性口炎病毒（VSV）和传染性法氏囊病病毒（IBDV） LX强毒株的活性比较研究；采用MTS法进行了重组融合蛋白和rChIFN-α在体外促外周血T淋巴细胞（PBLC）和脾脏淋巴细胞增殖活性实验。将IBDV LX强毒株人工感染37日龄SPF鸡，同时分别选取在CEF细胞上抗VSV活性单位为200IU、1000IU、3000IU、5000IU的重组融合蛋白和rChIFN-蛋白采用注射方式进行鸡体内活性比较实验，以筛选重组融合蛋白和rChIFN-蛋白在鸡体内发挥最佳抗病毒和免疫增强活性的使用剂量；分别通过临床观察、检测攻毒前和攻毒后（dpc）不同时间鸡体的排毒率、IBDV在不同组织器官的动态分布、外周血带毒时间、外周血中ChIL-2、ChIL-4、ChIL-6、ChIFN-α、ChIFN-γ细胞因子的表达水平，鸡PBLC和脾脏淋巴细胞的增殖活性及外周血中淋巴细胞亚群等指标的差异以揭示重组融合蛋白和rChIFN-蛋白在鸡体内抗病毒和免疫增强作用的机理，并且筛选重组融合蛋白和rChIFN-蛋白在鸡体内发挥最佳抗病毒活性的最适剂量。采用流式细胞术检测14d的SPF鸡注射以上实验筛选出的最佳剂量的重组融合蛋白和rChIFN-蛋白后不同时间对鸡外周血T淋巴细胞亚群含量的影响。结果：重组融合蛋白可分别与抗rChIFN-和抗rChIL-2单抗发生特异性免疫反应，重组融合蛋白中rChIFN-蛋白和rChIL-2蛋白的相对含量分别为4.58×103pg.mL-1和1.06×103pg.mL-1；重组融合蛋白在CEF细胞上抗VSV和IBDV的活性单位分别为8.707×105IU/mL和5.7926×104IU/mL，rChIFN-蛋白对照的活性单位分别为2.1469×105IU/mL和1.4482×104IU/mL，两种蛋白抗VSV活性单位均高于抗IBDV，且重组融合蛋白的抗病毒活性高于rChIFN-α蛋白；重组融合蛋白具有显著的促PBLC和鸡脾脏淋巴细胞的增殖活性，且重组融合蛋白极显著高于rChIFN-α蛋白对照（p<0.01）。不同剂量的重组融合蛋白在鸡体的抗病毒活性存在差异。注射后不同时间，3000IU重组融合蛋白试验组的IBD典型症状持续时间、病死率、排毒率、各组织器官带毒率、外周血持续带毒率（28h、20％、22.2%、16.7%、23.5%）、血清中抗IBDV抗体水平等指标均显著低于其他剂量的重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白对照，ChIL-2、ChIL-4、ChIL-6、ChIFN-α、ChIFN-γ五种细胞因子的表达水平均显著高于其他组；12dpc时，不同实验组鸡的外周血T淋巴细胞、脾脏淋巴细胞增殖活性达到峰值，且3000IU重组融合蛋白实验组鸡的OD490值（0.2654、0.3406）均显著高于其他实验组鸡（p<0.05）；12dpc～35dpc期间，不同剂量的攻毒实验组鸡的CD4+/CD8+比值均显著低于相同剂量的重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白对照组，其中3000IU的重组融合蛋白攻毒组鸡的CD4+/CD8+比值显著高于其他剂量的攻毒实验组鸡和所有rChIFN-α蛋白对照攻毒实验组；以上各项检测指标表明，重组融合蛋白的体内、外抗病毒和免疫增强活性均高于rChIFN-α蛋白对照，且3000IU的重组融合蛋白在鸡体内具有最佳的抗病毒和免疫增强活性。重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白应用SPF鸡体后（3dpi），外周血中CD3+CD4+细胞的含量升高，CD3+CD8+细胞的含量降低，CD4+/CD8+比值大幅升高，且重组融合蛋白实验组CD4+/CD8+比值显著高于rChIFN-α蛋白实验组。结论：重组融合蛋白可与抗rChIFN-和抗rChIL-2单抗发生特异性免疫反应；在体外具有显著的抗VSV和IBDV活性和促外周血T淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖活性。不同剂量的重组融合蛋白在鸡体内可通过增强外周血T淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖活性、提高机体IFN-和Th1、Th2型细胞因子的表达水平、提高CD4+/CD8+比值等方式增强机体的细胞免疫和体液免疫应答水平，发挥非特异性抗病毒活性和免疫增强活性；3000IU的重组融合蛋白在鸡体内具有最佳的生物学活性；重组融合蛋白在鸡体内可提高外周血中CD3+CD4+细胞的含量，降低CD3+CD8+细胞的含量，使CD4+/CD8+比值大幅升高，增强机体细胞免疫能力。不同剂量的重组融合蛋白在鸡体内、外的生物学活性均显著优于rChIFN-蛋白对照。