【摘 要】
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本论文主要研究了生物酶催化法合成生物素重要中间体手性内酯和固定化酶拆分萘普生,此外还对从生物素废水中回收原料醇胺进行了初步的研究。首先筛选到对底物二甲酯具有选择
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本论文主要研究了生物酶催化法合成生物素重要中间体手性内酯和固定化酶拆分萘普生,此外还对从生物素废水中回收原料醇胺进行了初步的研究。首先筛选到对底物二甲酯具有选择性水解能力的微杆菌,研究了各种条件对于酶的催化活性的影响,其中包括底物浓度、pH值、温度、有机溶剂、分散剂、添加剂等。实验结果显示酶的催化活性在底物浓度为10mg/mL, pH为7.5的磷酸盐缓冲溶液中转化率较高,反应与温度呈正相关,在40℃时转化率较高,达到90%以上。添加聚乙二醇(6000)和p-环糊精对酶的催化效果有促进作用,其中p-环糊精效果明显,在相同的实验条件下,比不添加的转化率提高40%左右。通过酶催化结合化学还原得到的手性内酯e.e值达到97.9%,比旋光度为+60.5度,与标准工业样品的光学纯度相同。本论文第二部分研究了如何从生物素废水中回收原料(S,S)-2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇,本部分实验尝试了各种从生物素废水分离出醇胺的方法,其中用乙酸乙酯萃取,然后用甲醇/二氯甲烷体积比为1:10的混合溶剂洗涤粗品的方法,回收得到的醇胺纯度、产量都较高,是较为成功的方法。本论文第三部分研究了固定化脂肪酶对消旋萘普生的拆分。在固定水-有机溶剂两相系统中,来源于Candida rogusa的脂肪酶被有效的固定在MCM-41中孔分子筛上。固定化效率为100%。在相同条件下,固定化酶活性与自由酶相比提高了5倍。反应12天后(3批),剩余活性为69%。
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