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痛风和高尿酸血症是人类常见的嘌呤代谢紊乱引起的疾病,与体内血尿酸浓度升高有关。近几年来,随着经济的快速发展,人们的生活水平有了明显的提高,饮食中高脂肪和高嘌呤的摄入量有所增加,高尿酸血症和痛风的发病率也逐年升高。因此,研制高效、安全的降尿酸的药物已成为研究热点。课题组前期成果已从临床用方中获得了降尿酸效果良好的处方。本研究的目的是制定此降尿酸复方的质量控制标准。本文通过氧嗪酸钾构建了大鼠的高尿酸血症模型,结果表明降尿酸复方具有降低尿酸的作用,且同时对肝肾组织无明显损伤;利用二甲苯致小鼠耳肿胀和小鼠醋酸扭体化学刺激痛以及热板刺激痛实验,确定降尿酸复方具有抗炎镇痛的药理作用;通过最大给药量法证明降尿酸复方在临床用量下是安全无毒的。运用高效液相色谱法(HPLC)建立了降尿酸复方的高效液相色谱指纹图谱分析方法,确定方法条件为:Agilent Eclipse C-18(250 mm?4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.8 mL/min,检测波长290nm,进样10μL,检测时间60 min。此方法经方法学考察稳定可靠。通过上述方法建立了降尿酸复方指纹图谱的对照图谱,标定了10个共有特征峰。将降尿酸复方指纹图谱于降尿酸复方对黄嘌呤氧化酶的抑制率关联起来,利用灰色关联度法,进行“谱-效”分析,结果表明各个共有特征峰所代表的化学成分与降尿酸作用均具有一定的关联性。应用超高效液相色谱-四级杆-轨道阱高分辨率质谱(Orbitrap LC-MS)技术进行了降尿酸复方指标性成分的定性分析,将定性分析结果与高效液相色谱指纹图谱共有特征峰比对分析验证后,确定降尿酸复方主要指标性成分包括芒柄花苷,葛根素芹菜糖苷,葛根素和毛蕊异黄酮苷。结合谱效分析的结果来看,这四种成分对应的共有特征峰与降尿酸的药效关联度较高。进一步利用HPLC测定了13批降尿酸复方中四种指标性成分的含量,建立了降尿酸复方的质量标准。但是,不同批次降尿酸复方中的芒柄花苷的含量差距最大,不建议作为质控指标。所以,最后确定,降尿酸复方中降尿酸复方中葛根素的量不得少于4800μg/g,葛根素芹菜糖苷的量不得少于530μg/g,毛蕊异黄酮苷的量不得少于230μg/g。