胃癌仍是世界第四大常见恶性肿瘤,由于其发病率高、恶性程度高、治疗策略缺乏重大进展,仍是恶性肿瘤死亡的第二常见原因。手术切除仍然是胃癌最主要的治疗手段,但由于胃癌起病隐匿,缺乏特异性症状,在明确诊断时大多数已属于进展期,目前我国90%的住院治疗患者均属于进展期,早期胃癌患者只占10%左右,根据既往报告,粘膜内癌5年生存率接近100%施行正规治疗I期胃癌的5年生存率为82%-95%,II期为55%,III期为15%-30%,IV期仅2%。近年来化学极大的促进了胃癌的治疗,但化疗副作用亦很大,且肿瘤细胞可产生耐药性使化疗疗效降低,进展期胃癌的5年生存率依然小于30%。胃癌的临床预后主要取决于手术时病人的临床病理分期,目前胃癌的早期诊断主要依靠胃镜及肿瘤标志物筛查,但做胃镜痛苦大,病人耐受性差,被很大一部分应该做胃镜排除恶性肿瘤的病人排斥,因此不少胃癌病人被延误诊断,目前常用的胃癌肿瘤标志物其特异性及敏感性均不高,往往到进展期才会升高,满足不了胃癌早发现、早诊断、早治疗的要求。根据术后病人的随访资料可以发现,许多临床病理分期相同的胃癌患者其术后生存时间却有很大不同,一些分期较早的患者术后较早出现复发和转移,相反,一些分期相对较晚的术后患者出现复发和转移的时间却相对晚一些。近年来越来越多的研究发现许多遗传标记物影响胃癌的生物学行为。胃癌细胞中特定基因的异常表达和肿瘤发展关系密切,包括肿瘤生长、侵袭、转移以及抑癌基因的失活,特别是P53和APC基因。既往发现的胃癌遗传标记物不论敏感性还是特异性均不高,因此寻找新的遗传标志物将有利于进一步明确胃癌的生物学行为,为早期诊断和进一步制定治疗方案提供依据。Periostin,又称成骨细胞特异性因子2(osteoblast-specific factor-2),是一种分泌细胞黏附蛋白,最近的研究表明,periostin在多种肿瘤中表达上调,通过激活Akt/PKB和FAK信号通路促进癌细胞的形成、肿瘤组织血管生成、侵袭、转移,在多种肿瘤的发生发展中扮演重要角色,比如结肠癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、甲状腺癌和神经母细胞瘤。本研究旨在进一步明确periostin的异常表达与胃癌的临床病理及预后之间的关系,明确其对胃癌的生物学行为影响,为胃癌的诊断和治疗寻找新的突破口。第一部分periostin高表达与胃癌发展及预后的关系目的进一步明确成骨细胞特异性因子2(OSF-2)表达水平与胃癌形成、侵袭、转移及预后的关系。方法选择我院2008年1月一2010年12月收治的具有完整临床病理资料的316例胃癌术后患者的癌组织芯片对periostin蛋白的细胞定位及表达水平进行免疫组织化学检测分析,结合患者的临床病理资料,应用χ2检验比较periostin的表达情况与胃癌患者性别、年龄、Borrmann分型、肿瘤部位、肿瘤长径、T分期、N分期、TNM分期、胃癌细胞分化程度、有无术后化疗、术前血清CEA、术前血清CA19-9之间的内在联系,应用Kaplan Meier法计算、分析periostin表达水平与患者无病生存期及总生存期之间的关系,单因素及多因素生存分析采用Cox比例风险模型。结果periostin蛋白主要定位于细胞质,periostin蛋白在胃癌组织中表达的阳性率明显高于正常胃黏膜组织。Periostin表达水平与T分期、N分期、TNM分期有关,肿瘤侵袭胃壁越深,淋巴结转移数目越多,TNM分期越晚,periostin表达水平就越高,但与患者的性别、年龄、Borrmann分型、肿瘤部位、肿块长径、分化程度、血清CEA、血清CA199无明显相关性。COX单因素及多因素分析表明,Borrmann分型、肿瘤部位、肿块长径、T分期、N分期、TNM分期、血清CEA、periostin表达水平是胃癌患者无病生存期的影响因素,Borrmann分型、肿瘤部位、肿块长径、T分期、N分期、TNM分期、血清CEA、分化程度、periostin表达水平是胃癌患者总生存期的影响因素,T分期、N分期、TNM分期、术后化疗、periostin表达水平是胃癌患者无病生存期及总生存期的独立影响因素。结论periostin过表达与胃癌的发展密切相关,是胃癌患者术后预后不良的独立影响因素。第二部分periostin促进胃癌细胞增殖目的明确periostin对胃癌细胞增殖能力的影响。方法应用siRNA转染胃癌细胞,采用western blot、RT-PCR法检测转染率,应用CCK8法研究perostin被敲除后胃癌细胞的增殖能力变化。结果western blot、RT-PCR法检测发现periostin被明显敲低,CCK8法检测发现periostin敲低组的胃癌细胞增殖能力较对照组明显降低。结论periostin促进胃癌细胞增殖。