在引起内毒素血症和多器官功能衰竭的主要因素中,细菌内毒素(bacterial endotoxins,简称内毒素,ET)发挥着重要作用。临床上缺乏有效治疗内毒素血症的药物。近年来,用血液灌流吸附治疗内毒素血症的研究有一定的发展,但治疗效果受到血液灌流器吸附剂的限制。多粘菌素B(Polymyxin B ,PMB)能够特异结合ET并灭活其毒性,但由于其有明显的肾毒性、神经毒性等副作用,且难以从血液中清除,所以多粘菌素类杀菌剂在临床上没有得到广泛的应用。本研究针对细菌内毒素化学结构的特点,以PMB作为亲和配基固定到聚苯乙烯微球载体上,利用己二胺引入一定长度的间隔臂,通过戊二醛将PMB固定到载体上,制成了一种特异性ET亲和吸附生物材料,探讨其对ET、血液中蛋白质的吸附能力及对血液粘度的影响。主要工作包括:(1)通过改变氯甲基化聚苯乙烯微球上的活性基团,接上一定长度的碳氢臂,然后将PMB偶联在碳氢臂的游离端,制成新型的特异性内毒素亲和吸附剂, 采用红外光谱等方法来检测微球的空间臂组成和固定PMB的情况,结果表明PMB成功地偶联到载体上。(2)对PMB固定化行为进行初步的定性定量研究。认为戊二醛固定化PMB的最适条件为:PMB配体的初始浓度为4mg/ml时活化效率最高;活化载体时pH值为7.0;戊二醛的活化浓度为5%;偶联时的pH为7.0;偶联时间大于4小时。(3) 争对本实验研究,建立起内毒素的定量检测法,并考察温度、pH、血浆浓度对此内毒素的定量检测法的影响,发现血浆强烈干扰内毒素的荧光检测,其余两者的影响不大。(4)通过模拟体外灌流实验,研究固定PMB聚苯乙烯吸附微球对内毒素的廓清作用与微球量时间的关系。结果显示:吸附微球对内毒素的廓清作用随着微球量的增加而增强;在灌流起始40min内对溶液中的内毒素血浆的吸附作用效果很好,到50min时吸附微球表面开始有解离现象。(5)研究固定PMB聚苯乙烯吸附微球在体外血液灌流过程中对血液中总蛋白的吸附情况。体外血液灌流实验结果显示,固定PMB聚苯乙烯吸附微球对血浆中总蛋白的吸附率低于10%。(6) 考察固定PMB的聚苯已烯吸附微球在改善血液粘滞性方面的作用。实验说明,加入细菌内毒素的血液出现粘、浓等变化,而经过固定PMB的聚苯已烯微球吸附柱灌流后,血液粘度有明显的改善作用,说明此吸附微球具有改善血液粘<WP=5>滞性的作用。通过实验研究发现,用固定PMB的聚苯乙烯吸附微球用于血液灌流,能较好地清除血浆中ET,对血液中蛋白质吸附较少,而且具有改善血液粘滞性作用。因此,固定PMB的聚苯乙烯吸附微球有希望用于血液灌流,作为内毒素血症治疗的辅助手段。