目的：以人血清IgG,I gM为目标检测蛋白,制备可同时检测多指标的蛋白芯片,作为膀胱癌多指标检测的前期准备试验。方法：在硝酸纤维素膜上按照倍比稀释法同时包被两种抗体,羊抗人抗体IgG及兔抗人抗体IgM,制备蛋白芯片。先以不同稀释倍数的工gG(标准品)作为检测蛋白抗原与包被在硝酸纤维素膜上的抗体特异性结合杂交,再与加入胶体金标记的抗体(羊抗人抗体IgG)特异性结合杂交,完成染色后应用芯片扫描仪对光学信号的灰度值进行分析,并且绘制出标本中不同浓度梯度的IgG对光学信号灰度值的标准曲线,找到最佳包被条件,并行改良银染显色以进一步降低检测下限,然后,用174号血清在同样条件下,与该芯片杂交,再与胶体金标记的二抗杂交显色,进行不同检测方案比较,确定多蛋白指标检测最佳方案,并摸索多种抗原最佳包被条件。结果：1、该芯片可以特异性的与相应的抗原杂交,无交叉反应。2、检测下限可以达到100ng／ml,具有良好的梯度及线性关系,灵敏度达到300ng／ml.3、摸索出可在日常光线条件下操作的银加强体系,检测下限可进一步提高10到20倍,可用于各种胶体金检测抗原或抗体技术。4、进行胶体金融合方法比较,双抗体混合胶体金标记方法效果较好,而且有很好的重复性。结论：该芯片可用于同时同步检测样本中多种抗原指标,是一种有效的抗体检测新方法,可配合改良银加强法进一步降低检测下限。