灿烂、哈维弧菌噬菌体的分离鉴定及其生物学特性的研究

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:gauxten01
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
在水产养殖业中,海水养殖生物的弧菌病是1种危害非常严重、流行范围比较广的传染性疾病。哈维弧菌和灿烂弧菌就是其中两种致病菌。哈维弧菌和灿烂弧菌都属于革兰氏阴性菌。哈维弧菌是一种可以发光、在海水分布范围非常广的致病细菌。早期有关哈维弧菌的报道并不是很多,但是随着哈维弧菌给水产养殖业带来的损失越来越大,近10几年里我们对其报道变得越来越多。哈维弧菌是很多海水养殖鱼类的致病菌,也是一些亚洲国家(印度,泰国,中国等)养殖对虾的首要致病菌。灿烂弧菌可以引发大西洋鲑、鳟鱼、大菱鲆等许多种鱼类患病,主要症状为鱼类尾部出血、表皮溃烂,进而形成溃疡。灿烂弧菌也是刺参腐皮病的重要致病菌之一。现在我们主要的预防和治疗手段还是依靠消毒剂和抗生素,这些传统的抗生素类药物滥用很容易使细菌产生抗药性同时还伴随着药物残留等食品的安全问题,所以我们急需寻找新的抗菌手段。噬菌体作为一种新型的抗菌制剂,具有无副作用、病原菌很难对其产生抗性、无残留等一系列的优点。越来越的受到人们的广泛关注。这对于养殖过程中潜在的环境污染问题,保持水产养殖业的健康持续发展具有十分重要的意义。本研究从养殖场的水样中分离得到哈维弧菌噬菌体和灿烂弧菌噬菌体并考察其生物学特性,为以后用噬菌体治疗细菌所引起的传染性疾病奠定了基础。因此具有十分重要的理论和实践意义。实验结果如下:1、以哈维弧菌和灿烂弧菌作为宿主菌,利用双层琼脂平板法从废水样品中分别分离得到了1株噬菌体,经过纯化后利用液体增值的方法可以得到效价为108的噬菌体。噬菌斑呈圆形,经过12个小时以上的培养,直径分别达到哈维弧菌噬菌体2mm,灿烂弧菌噬菌体1.5mm,中心透明,边缘清晰。噬菌体经过增之后的效价比较高,体外裂解能力较强,可以作为后续实验的实验材料。2、分别对哈维弧菌噬菌体和灿烂弧菌噬菌体的生理生化进行的测定,结果显示:两株噬菌体对氯仿均不敏感,证明其尾部不含有脂类物质。2株噬菌体的热稳定性一般,在50℃的情况下还能保持一半的效价,60℃效价基本为0。PH的稳定性较强,在PH为4-11之间均有效价,当PH在6-8的时候2株噬菌体的效价最好。哈维弧菌噬菌体最佳感染复数为0.0001;灿烂弧菌噬菌体为0.001。哈维弧菌噬菌体的潜伏期是40分钟,爆发期为1小时;灿烂弧菌噬菌体的潜伏期是30分钟,爆发期为1小时。3、通过电镜观察2中噬菌体均为有尾丝的正20面体结构,哈维弧菌噬菌体全长235nm,灿烂弧菌噬菌体全长315nm。用10种不同的细菌分别验证2种噬菌体的特异性证明2种噬菌体的特异性均非常的强。但是它们的裂菌普却很窄,哈维弧菌噬菌体仅能对个别的其他哈维菌株有裂解作用,灿烂弧菌噬菌体仅能对宿主菌有裂解作用。总而言之,分离、纯化得到的这两株噬菌体具有较强的裂菌能力,同时也有一定的环境耐受性,为水产养殖疾病防控提出了一种新的手段,为进一步研发以噬菌体为基础的水产动物疾病反馈措施提供了参考。
其他文献
近年来,随着养殖水环境的恶化,环境胁迫对水产动物免疫机能影响的研究已倍受关注。本试验以pH7.8的自来水为对照,用不同pH(4.5,6.0,7.5,9.0,10.5)和不同浓度的硫酸铜(0.0625,
本实验以引进的紫扇贝和海湾扇贝为亲本,建立了紫扇贝自交组合(ZZ)、海湾扇贝自交组合(HH)、紫扇贝×海湾扇贝(ZH)和海湾扇贝×紫扇贝(HZ)共4个实验组合。对紫扇贝、海湾扇贝
半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)是我国近海的大型名贵经济鱼类。本研究利用分子生物学和mRNA原位杂交技术,分析了Vasa、卵泡抑素(follistatin,FST)、抗缪勒氏管激素(ant
大眼鳜(Siniperca kneri)隶属鲈形目(Perciformes)、鮨科(Serranida)、鳜亚科(Sinipercinae)、鳜属(Siniperca),俗称桂花鱼、白桂等,分布于中国长江、淮河及其以南水系,为中