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目的:使用生物信息学的方法在公共数据平台(Gene Expression Omnibus,GEO)上进行数据下载并分析,筛选出肺癌的差异基因,证明miR-96是通过作用于FOXO3a促进肺癌的生长及转移。方法:1.在GEO数据库平台上下载3组关于肺癌组织与正常组织的差异基因表达阵列数据,进行生物信息学分析后筛选出差异基因。在TCGA数据库中下载肺癌患者的临床数据,分析miR-96在肺癌患者中的生存时间的差异。2.使用qPCR技术检测mi R-96基因在正常肺上皮细胞(BEAS-2B)、肺癌细胞(A549、NCI-1975)中表达量。3.将miR-96的mimic、inhibitor及对照物转染至肺癌细胞中,用qPCR的方法检测miR-96在细胞中的转染效率。4.在转染后的细胞中使用CCK-8实验、划痕实验、Transwell、克隆形成实验观察mi R-96对细胞的增殖、迁移等能力;流式细胞实验分析细胞凋亡的变化;Western Blot检测细胞的相关蛋白的表达情况。5.使用公共数据库(TargetScan,Pictar,mi RANDA)筛选出FOXO3a作为miR-96的直接靶点,并使用荧光素酶报告实验验证其直接作用机制,最后通过Western Blot实验进行验证。结果:1.在GEO数据库中筛选出GSE 102287 ID 200102287;GSE63805 ID200063384;GSE29248 ID 200029248的3个数据并进行下载,3个数据中共存的差异表达基因有49个基因,通过TCGA数据库筛选出miR-96表达增高的患者其生存率较低(P<0.05)。2.miR-96在肺癌细胞A549细胞及NCI-1975细胞显著高于正常肺上皮细胞BEAS-2B的表达(P<0.05)。3.转染mimic后肺癌细胞(A549、NCI-1975)中miR-96的相对表达量显著升高(P<0.05);转染inhibitor后显著降低(P<0.05)。4.CCK-8实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验结果发现,mimic组在两株细胞能促近肺癌细胞的增殖、迁移(P<0.05)。inhibitor组起到显著抑制作用(P<0.05)。5.流式细胞检测发现:mimic组能显著抑制两株肺癌细胞的凋亡(P<0.05);在inhibitor组能够显著促进两株细胞的凋亡(P<0.05)。6.使用公共数据库(TargetScan,Pictar,mi RANDA)筛选出FOXO3a作为miR-96的靶基因之一,通过荧光素酶报告实验证实FOXO3a为miR-96的直接作用靶点,且通过WB实验验证其下游蛋白FOXO3a的表达量,证实miR-96是通过FOXO3a促进肺癌生长。结论:1.生物信息学分析对于癌症的差异基因有一定的预测意义;2.miR-96通过作用于FOXO3a来促进肺癌的发生发展,并影响患者的5年生存率。