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目的建立Mtb感染小鼠DC2.4细胞模型,探讨不同毒力Mtb诱导小鼠DC2.4细胞凋亡的差异及相关分子机制,并研究TRL4-NOD2 (T4N2)协同信号传递靶向增强DC的活性以及活化的DC对Mtb生长的抑制率,进而分析DC在抗结核感染中的机制,为研究结核的致病机制及新型抗结核的免疫疗法提供新的线索和理论依据。方法分别采用结核分枝杆菌标准减毒株(H37Ra株)、大理临床分离株(14-11株)感染小鼠DC2.4细胞,建立小鼠DC2.4细胞体外Mtb感染模型,采用Annexin V-FITC /PI荧光标记流式细胞术依次检测感染后五个不同时间段小鼠DC 2.4的细胞凋亡情况,并分析其差异表达。分别用TLR4配体(LPS)、NOD2配体(MDP)和TLR4-NOD2 (T4N2)双配体刺激小鼠DC2.4后,酶联免疫吸附试验(ELISA)法定量检测不同时间段上清液中IL-6和IL-12的分泌情况。用Mtb感染DC 4h后,再分别用单配体LPS、MDP以及T4N2双配体刺激培养24h,收集细胞并裂解后接种于罗氏培养基,3周后观察并计数菌落生长数,计算细菌生长的抑制率。实验数据应用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。结果1.结核分枝杆菌标准减毒株H37Ra与大理临床分离株14-11均能诱导小鼠DC2.4细胞凋亡,在感染后6h凋亡率升高明显,两组细胞比较凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。大理临床分离株14-11诱导小鼠DC2.4细胞凋亡率在诱导后各时间点均低于标准减毒株H37Ra诱导的凋亡率,诱导后6h凋亡率升高显著。2. LPS配体刺激组、MDP配体刺激组及T4N2双配体刺激组分别刺激小鼠DC2.4后均能诱导IL-6、IL-12细胞因子释放,T4N2双信号刺激组与空白组、LPS组、MDP组比较细胞因子IL-6 (P<0.01)和IL-12 (P<0.01)分泌增多,在不同时间段均存在差异(P <0.01)。3.TLR4 配体(LPS)、NOD2 配体(MDP)和 T4N2 双配体(LPS+MDP)组分别刺激小鼠DC2.4后,Mtb的生长均有不同程度的抑制,T4N2双配体活化的DC2.4对Mtb的生长抑制率较对照组及单配体刺激组明显增强。结论1.小鼠DC2.4细胞被不同毒力的Mtb感染后均能快速诱导其凋亡,凋亡率与所诱导结核菌株的不同毒力有关,毒力较弱的H37Ra标准减毒株较毒力较强的大理临床分离株14-11诱导的凋亡率更高。2. TLR4-NOD2协同信号传递能增强DC的活化。3.活化后的DC可抑制Mtb的生长。