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目的:通过UVA照射HaCaT细胞建立HaCaT细胞光损伤模型并将CGF应用于光损伤后的细胞,探讨CGF对UVA致HaCaT细胞光损伤的修复作用。方法:1.HaCaT细胞培养HaCaT细胞培养于37°C,5%CO2的无菌培养箱中。细胞融合度达到80%以上时进行实验。2.UVA照射剂量筛选选取10J/cm2、20J/cm2、30J/cm2为UVA照射剂量,MTT法检测各组细胞在570nm处的吸光度值并计算不同照射剂量下细胞存活率。3.CGF浓度筛选选取5%、10%、15%、20%CGF为CGF处理浓度,MTT法检测各组细胞在570nm处的吸光度值,所得数据经统计学分析筛选出CGF浓度。4.实验分组根据筛选出的UVA照射剂量与CGF浓度,将细胞分为三组:对照组:HaCaT细胞不接受UVA照射、DMEM培养液培养24h。照射组:HaCaT细胞接受剂量为30J/cm2的UVA照射、DMEM培养液培养24h。CGF处理组:HaCaT细胞接受剂量为30J/cm2的UVA照射、5%CGF+DMEM培养液培养24h。5.细胞形态学观察三组细胞,分别于倒置显微镜下观察照射后即刻及照射后24h各组细胞形态学变化。6.细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）表达观察三组细胞,于波长488nm处荧光倒置显微镜下观察照射后24h ROS的表达情况。7.细胞内超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）活力检测三组细胞,于波长为550nm处酶标仪上检测各组吸光度值,根据公式计算出照射后24hSOD的活力。8.细胞内核转录因子Nrf2表达观察三组细胞,选择Nrf2作为目的蛋白进行免疫细胞化学染色,检测Nrf2蛋白的表达与分布。9.统计学分析采用SPSS21.0统计软件进行分析,各组数据以均数±标准差（?x±s）的形式表示,计量资料正态方差齐采用单因素方差分析,方差不齐与计数资料采用非参数检验。检验水准a=0.05,P<0.05,差异有显著性。结果:1.UVA照射剂量筛选未照射组、10J/cm2、20J/cm2、30J/cm2的UVA照射剂量下的细胞吸光度值分别为0.274±0.035,0.241±0.023,0.238±0.026,0.199±0.016,相应的细胞存活率分别为87.91%、86.86%、72.53%。30J/cm2UVA照射组与未照射组有统计学差异（P<0.05）,选择30J/cm2作为后续实验照射剂量。2.CGF浓度筛选未照射组、30J/cm2组以及5%CGF组、10%CGF组、15%CGF组、20%CGF组各组细胞吸光度值分别为0.223±0.014,0.157±0.012,0.253±0.0 26,0.222±0.017,0.221±0.011,0.199±0.017。CGF浓度为5%、10%、15%的细胞吸光度值与30J/cm2均有统计学差异（P<0.05）,5%处细胞吸光度值最大,选择5%作为CGF实验浓度。3.细胞形态学观察对照组细胞形态为多边形,排列紧密;照射组照射后即刻细胞皱缩,细胞间隙增大。24h后,30J/cm2组细胞变小变狭长,细胞间间隙逐渐增大;CGF处理组细胞形态较照射组规则,细胞间间隙减小。4.细胞内活性氧簇ROS表达观察对照组细胞荧光强度较弱。照射组细胞内荧光强度明显升高,ROS表达增强。CGF处理组细胞荧光强度较照射组降低,个别细胞荧光表达较强度。5.细胞内超氧化物歧化酶SOD活力检测对照组、照射组、CGF处理组三组细胞内SOD活力分别为32.350±1.116,24.457±2.443,29.846±0.588,各组均有统计学差异（P<0.05）。6.转录因子Nrf2表达观察对照组内Nrf2主要在细胞质内表达。照射组内部分Nrf2蛋白由细胞质向细胞核中转移,Nrf2在细胞质与细胞核内均表达。CGF处理组Nrf2较照射组在细胞核内表达增强,核积累明显增加。结论:1.UVA照射能够造成HaCaT细胞损伤。2.CGF可能通过促进Nrf2由细胞胞质向胞核转移而提高SOD活力、清除细胞内过量ROS,从而提高HaCaT细胞活性、修复损伤细胞。