本文以拟黑拟青霉、蝉拟青霉、古尼拟青霉、蛹草拟青霉和小座被毛孢为研究对象，从形态、分子、化学成分三个层面进行研究，试图揭示它们的生物学特征和遗传结构，并为人工培养虫草提供基础参考资料。研究结果概括如下：　　 1、无性型形态特征　　 拟黑拟青霉：PPDA培养基，25℃，10d。菌落直径2.5cm左右，高凸，白色绒状，背面棕黄。巨大分生孢子，长卵圆形，柱形，鞋垫形，2.50～62.50μm×1.25～10.00μm；小分生孢子圆形，卵圆形，锥形，2.18～4.85μm×1.90～4.52μm。菌丝较细，直径为1.14～2.39μm。　　 蝉拟青霉：PPDA培养基，25℃，10d。菌落直径5.0cm左右，低凸，灰白色绒状，背面淡黄。分生孢子长卵圆形，锥形，柱形，5.27～10.88μm×1.63～3.46μm。菌丝较粗，直径为1.42～3.54μm。　　 古尼拟青霉：PPDA培养基，25℃，10d。菌落直径3.9cm左右，隆起，银灰色，背面褐色。分生孢子卵圆形，圆形，锥形，2.91～7.29μ×2.77～7.00μm。菌丝较粗，直径为1.34～3.15μm。　　 蛹草拟青霉：PPDA培养基，25℃，10d。菌落直径3.6cm左右，笠状，中间白色边缘鹅黄色，背面黄色。分生孢子多数近球形1.67～4.01μm×1.41～3.97μm。菌丝较细，直径为1.17～2.09μm。　　 小座被毛孢：PPDA培养基，25℃，10d。菌落直径1.5左右，隆起，巧克力色有褶皱，背面深褐色。分生孢子肾形，梭形，长卵圆形，5.98～13.19μm×1.77～4.04μm。菌丝较粗，直径为1.37～3.62μm。　　 通过研究发现，五种虫草无性型在不同培养基上生长快慢不同，同种虫草无性型不同个体在相同培养基上的生长快慢也不同。　　 2、无性型遗传特征　　 采用DALP(Direct amplification of length polymorphisms)分子标记技术检测5种虫草无性型，5组引物共扩增出204条DNA片段。拟黑虫草无性型的5个居群，总多态位点为63，PPB为30.88％，总观察等位基因数Na为1.3088，总有效等位基因数Ne为1.1065，总Nei's多样性指数H为0.0686，总Shannon多样性指数I为0.1105，总的基因多样性Ht为0.0644，居群内基因多样性Hs为0.0452，居群间分化系数Gst为0.5187。　　 蝉拟青霉1个居群总多态位点为2，PPB为0.98％，Na为1.0098，Ne为1.0054，H为0.0035，I为0.0053。　　 小座被毛孢1个居群PPB，Na，Ne，H，I分别为4.41％，1.0041，1.0183，0.0121，0.0194。　　 古尼拟青霉2株菌株和蛹草拟青霉2株菌株的PPB，Na，Ne，H，I都为最小值。　　 UPGMA聚类分析显示，五种虫草无性型均分开，分为三大支，蝉拟青霉、小座被毛孢、蛹草拟青霉聚为一支，其次与拟黑拟青霉聚为一支，最后古尼拟青霉为一支。　　 3、亲缘关系　　 对五种虫草无性型各居群的20个个体进行ITS序列测序。结果表明，同种虫草无性型来自居群间的遗传变异很小，种间的遗传变异较大。同时ITS序列测定证实了虫草有性型与无性型的同质性。亲缘关系显示，拟黑拟青霉与蛹草拟青霉和蝉拟青霉关系相对比较近，其次是与古尼拟青霉，小座被毛孢与冬虫夏草关系最近，但与其他四种关系最远。前四种都属于拟青霉属的种，小座被毛孢和冬虫夏草的无性型中华被毛孢属于被毛孢属，两个属明显分开。表明ITS序列分析可以作为虫草属分类鉴定的一个比较重要的方法。　　 4、化学成分　　 对五种虫草无性型的多糖、虫草酸、总皂苷、总黄酮、虫草素和虫草腺苷研究发现，六种化学成分含量在种间的分布不同，而且个体间的遗传变异大于居群间的遗传变异。　　 四种虫草无性型菌丝重、多糖、虫草酸、虫草素和虫草腺苷随培养时间变化呈现出各不相同的规律。相对而言，菌丝重、多糖、虫草酸变化比较相似，而蛹草拟青霉的虫草素和虫草腺苷与其他三种的变化不同。　　 四种虫草无性型种内和种间杂交后，菌丝重、多糖、虫草酸、虫草素和虫草腺苷的变化有高有低，也有介于二者之间，而且各个指标的变化并没有相关性。　　 培养基中的营养成分对拟黑拟青霉多糖、虫草酸、虫草素和虫草腺苷影响的主次顺序分别不同，最佳配比也各不相同。这对于虫草无性型的人工培养具有指导意义。