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目的:1.探究VX-680作用HUVECs(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,人脐静脉内皮细胞)后,对其增殖、凋亡、迁移及血管生成的影响。2.探讨VX-680影响血管生成的分子机制。方法:1.利用MTT和平板克隆形成实验、DAPI染色法、划痕愈合实验、体外小管形成实验和鸡胚尿囊膜实验分别检测不同浓度(0μM,1.5μM,2.25μM)的VX-680对HUVECs增殖、凋亡、迁移及血管生成的影响。2.不同浓度(0μM,1.5μM,2.25μM)的VX-680对HUVECs作用24 h后,采用Western blot检测VX-680对凋亡分子Caspase-3和PARP,血管生成相关因子VEGF以及信号通路相关蛋白AKT/p-AKT表达水平的影响。结果:1.不同浓度梯度的(0μM,1.5μM,2.25μM)VX-680对HUVECs进行处理后,MTT实验结果显示,HUVECs增殖率随VX-680药物浓度的升高而逐渐降低(P<0.01);克隆形成实验结果显示,HUVECs克隆形成率随VX-680药物浓度的升高而逐渐降低(P<0.01);DAPI染色实验结果显示,与对照组相比,实验组HUVECs出现核浓缩、核碎裂的比例增多,且细胞凋亡率随VX-680药物浓度的升高而逐渐升高(P<0.01);划痕愈合实验结果显示,HUVECs的迁移速率随VX-680药物浓度的升高而逐渐降低(P<0.01);体外小管形成实验和鸡胚尿囊膜实验结果均显示,血管生成数随VX-680药物浓度的升高而逐渐减少(P<0.01)。2.HUVECs经不同浓度VX-680处理24 h后,Western blot结果显示,随着VX-680药物浓度的升高,细胞中凋亡分子Caspase-3酶原(procaspase-3)和PARP原带的表达水平逐渐降低,而PARP剪切带(cleaved-PAPR)的表达量则逐渐升高,血管生成相关因子VEGF的表达水平逐渐降低。AKT信号通路中AKT活化形式(p-AKT)的表达水平逐渐降低,而总蛋白AKT没有发生明显变化。结论:1.VX-680能显著地抑制HUVECs的增殖、迁移、血管形成能力,促进细胞凋亡,且作用效果呈现出剂量效应关系。2.VX-680可以通过激活Caspase-3与PARP蛋白来促进HUVECs凋亡;通过下调VEGF的表达和抑制AKT的活化而抑制HUVECs的血管生成能力。目的:研究YAP1抑制剂维替泊芬(Verteporfin,VP)对食管癌细胞KYSE150增殖、凋亡、黏附以及迁移的影响。方法:用不同浓度VP(0μM,0.15μM,0.3μM)作用细胞24 h,倒置显微镜下观察KYSE150细胞形态变化,CCK-8实验测定KYSE150细胞增殖抑制率,DAPI染色检测KYSE150细胞凋亡情况,细胞缓慢聚集实验和细胞分离实验检测KYSE150细胞间的黏附能力,划痕愈合实验检测KYSE150细胞迁移能力。结果:与对照组相比,随着VP浓度的增加,显微镜下观察发现贴壁细胞变小变圆,部分细胞漂浮;CCK-8实验显示VP以浓度及时间依赖性的方式抑制KYSE150细胞增殖(P<0.05);DAPI染色显示部分细胞出现核浓缩、核碎裂现象,且KYSE150细胞凋亡数目随VP药物浓度的升高而逐渐增多(P<0.01);细胞缓慢聚集实验和细胞分离实验显示随VP药物浓度的升高,KYSE150细胞团块减少,体积增大,密度增加(P<0.01);划痕愈合实验显示KYSE150细胞迁移能力随VP药物浓度的升高而逐渐减弱(P<0.01)。结论:VP能显著地降低KYSE150细胞的增殖、迁移能力,同时促进细胞凋亡和提高细胞间黏附能力,且作用效果呈现出剂量效应关系。本研究为探寻新的食管癌治疗药物提供了一定的研究基础。