论文部分内容阅读
目的：应用SAMP8小鼠为研究对象,观察去势及雄激素补充治疗对海马突触结构的影响,初步探讨其作用机制。方法：选用雄性6月龄快速老化SAMP8小鼠15只,随机分为假手术组(P8组)、去势组、去势+双氢睾酮补充治疗组(DHT组),每组5只,选取雄性6月龄抗快速老化SAMR1小鼠5只作为同源正常对照组(R1组)。去势组和DHT组小鼠切除睾丸,DHT组于去势术1天后,颈背皮下注射双氢睾酮1 mg/(kg·day),其余各组注射等量医用玉米油,每天注射1次,共注射21天。组织制备、切片及染色观察：将输液针刺入左心室,剪开右心耳,用生理盐水快速冲洗,3%多聚甲醛,1%戊二醛灌注固定。自上丘至视交叉节段冠状位取脑组织,用刀片将此组织从正中矢状位分为左右两半,左半脑用于Golgi染色,光镜下计数树突棘密度；右半脑用于制备透射电镜样本,观察海马CA1区突触超微结构,并应用体视学定量方法计算各组海马CA1区兴奋性突触数密度、突触接触区面密度、突触后致密物质平均厚度等参数。结果：1 Golgi染色结果：R1组海马CA1区和CA3区二、三级顶树突树突棘密度分别为1.40±0.19个/μm和1.71±0.38个/μm,高于其他各组(P＜0.01)。P8组CA1区和CA3区分别为1.17±0.18个/μm和1.46±0.41个/μm；DHT组CA1区和CA3区分别为1.11±0.15个/μm和1.35±0.19个/μm；P8组与DHT组密度相近(P＞0.05),均小于R1组,去势组CA1区和CA3区密度分别为0.72±0.16个/μm和1.03±0.26个/μm,相比其他各组密度最小(P＜0.05)。2透射电镜观察及体视学分析结果：R1组海马CA1区放射层兴奋性突触数密度Nv、突触接触区面密度Sv、突触后致密物质平均厚度Dv分别为0.14±0.02个/μm3、0.51±0.10μm2/μm3、51.3±10.9nm,各值均高于其他各组(P＜0.01)。P8组海马CA1区突触Nv、Sv、Dv各值分别为0.10±0.01个/μm3、0.36±0.02μm2/μm3、31.8±8.7nm;DHT组Nv、Sv、Dv各值分别为0.09±0.02个/μm3、0.33±0.06μm2/μm3、28.8±9.7nm,P8组与DHT组各项均相近(P＞0.05),均小于R1组,去势组Nv、Sv、Dv各值分别为0.07±0.01个/μm3、0.19±0.03μm2/μm3、22.8±5.8nm,相比其他各组密度最小(P＜0.05)。结论：1 SAMP8小鼠作为理想的老年性痴呆研究模型,其记忆认知功能缺陷与海马兴奋性突触数量下降及突触后致密物质含量减少有关。小鼠去势后,其雄激素缺乏能进一步加重海马兴奋性突触病理改变。2雄激素可一定程度提高去势SAMP8小鼠海马兴奋性突触数目及突触后致密物质含量；雄激素对学习认知能力的改善作用可能与促进突触结构可塑性有关。