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目的:研究影响胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿Kasai术后自体肝生存时间的相关因素,包括Kasai手术日龄、胆管炎的发生频率和时间、胆管反应、胆管板畸形等相关因素的分析,同时分析影响胆管炎发生的相关病理因素。方法:1.选取2011年1月—2012年12月间在天津市儿童医院确诊为BA且行Kasai手术的患儿42例,按照自体肝生存时间分为3组,A组为Kasai术后自体肝生存时间超过5年的BA患儿(n=15);B组为自体肝生存时间在2~5年之间的BA患儿(n=11);C组为Kasai术后2年内死亡或因肝衰竭行肝移植的BA患儿(n=16)。回顾性分析患儿的临床病例资料,包括Kasai手术日龄、胆管炎的发生时间和频率、预后结局(长期自体肝生存、肝移植、死亡)等。分析Kasai手术日龄、胆管炎的发生时间和频率是否影响BA患儿自体肝生存时间。2.选取2011年1月—2012年12月期间在天津市儿童医院确诊为BA且行Kasai手术的这42例BA患儿为BA组,BA组亚组分组同方法1;对照组选取胆总管囊肿患儿10例;胆汁淤积症患儿10例;尸检组5例。手术时楔形切除BA、胆总管囊肿、胆汁淤积症患儿肝脏右叶前缘标本1块,楔形切除非肝胆疾病死亡的肝脏右叶前缘标本1块,对肝组织标本进行苏木素/伊红(HE)、马松(Masson)及免疫组织化学染色。通过HE染色主要观察肝组织的结构改变、胆管增生、胆栓、炎症细胞浸润等基本病理改变;Masson染色观察肝组织的肝纤维化程度;免疫组织化学染色定性及定量分析不同分组中CK7、CK19、CD56及EpCAM等胆管反应相关抗体的表达;HE染色与CK19免疫组织化学染色下观察胆管板畸形的发生情况。分析胆管反应与胆管板畸形是否影响BA自体肝生存时间。3.通过回顾性分析BA患儿胆管炎发生与自体肝生存时间的资料,发现胆管炎的发生时间与频率影响自体肝生存时间。又收集2016年1月—2016年12月的30例BA患儿,共计72例患儿(男34例,女38例)。依照日本Ohkuma’s肝纤维化分级标准进行分组,分为肝纤维化Ⅰ级(6例)、Ⅱ级(25例)、Ⅲ级(30例)、Ⅳ级(11例)。术中获取的肝组织标本采用苏木素/伊红(HE)、马松(Masson)染色评价其纤维化程度,免疫组织化学染色检测T淋巴细胞表面抗原(CD4、CD8)、巨噬细胞特异性抗体(CD68)等炎症细胞特异性标志抗体表达情况。结合Kasai术后随访资料,分析BA患儿肝组织炎症细胞浸润程度、肝纤维化程度与Kasai术后胆管炎的关系。结果:1.A组有1例患儿在75月时因肝衰竭行肝移植治疗,其他患儿截止至最后一次随访都长期自体肝存活;B组有7例患儿因肝衰竭行肝移植手术,其余4例患儿因肝衰竭死亡;C组有7例患儿因肝衰竭行肝移植手术,其余9例患儿因肝衰竭死亡。2.A、B、C三组患儿Kasai手术日龄分别为(61.93±10.27)d、(63.27±11.06)d、(67.56±19.98)d,三组比较差异无统计学意义(F=0.595,P=0.556)。3.42例BA患儿Kasai术后胆管炎、早期胆管炎和频发胆管炎的发生率分别为54.8%、37.5%、22.2%。A、B、C三组BA患儿胆管炎、早期胆管炎和频发胆管炎的发生率分别为(33.3%、13.3%、6.7%)、(54.5%、36.4%、27.3%)、(75%、56.3%、50%)。三组比较早期胆管炎和频发胆管炎的发生率均与自体肝生存时间有关,差异有统计学意义(c~2=6.214,P=0.045;c~2=7.136,P=0.028)。两两比较,A组BA患儿的胆管炎、早期胆管炎和频发胆管炎的发生率明显低于C组(P<0.05)。4.有2.38%(1/42)的患儿伴发肝外先天性畸形(镜像右位心和房间隔缺损)。5.BA组肝组织肝纤维化程度、胆管增生、胆栓分级高于胆总管囊肿、胆汁淤积和尸检正常对照组,差异有统计学意义(χ~2=36.244,P=0.000;χ~2=54.644,P=0.000;χ~2=26.976,P=0.000)。6.CK7、CK19、CD56、EPCAM四种蛋白BA组表达量明显高于胆总管囊肿、胆汁淤积和尸检正常对照组,差异有统计学意义(F=131.967,P=0.000;F=1726.885,P=0.000;F=98.141,P=0.000;F=73.642,P=0.000)。7.CK7、CK19、CD56和EPCAM四种抗体在不同自体肝生存时间的3组中表达量不同,差异有统计学意义(F=127.91,P=0.000;F=5.958,P=0.006;F=93.292,P=0.000;F=51.824,P=0.000)。8.A组、B组、C组胆管板畸形的发生率比较,差异有统计学意义(χ~2=6.866,P=0.032);自体肝生存时间不超过2年(C组)与自体肝生存时间大于2年BA患儿(A+B组)比较,差异有统计学意义(χ~2=6.108,P=0.013)。9.72例BA患儿均获得随访,胆管炎、早期胆管炎和频发胆管炎的发生率分别为55.6%、37.5%、22.2%。不同肝纤维化分级BA患儿Kasai术后胆管炎、早期胆管炎和频发胆管炎的发生率差异有统计学意义(c~2=10.268,P=0.016;c~2=8.390,P=0.039;c~2=9.125,P=0.028)10.病理结果显示肝组织以淋巴细胞浸润为主;Ⅰ级、Ⅳ级组CD4表达水平高于Ⅱ、Ⅲ级组,不同肝纤维化分级CD68表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.年龄对BA患儿自体肝生存时间的影响不大;早期发生胆管炎和胆管炎的反复发作可影响BA患儿自体肝生存时间。2.胆管反应、胆管板畸形可影响BA患儿自体肝生存时间,胆管反应相关抗体CK7、CD56及EpCAM表达多,存在DPM均可影响自体肝生存时间。3.BA患儿Kasai术后胆管炎的发生与肝纤维化程度和肝组织炎症细胞,尤其T淋巴细胞亚群的浸润有关。