头花蓼总多酚提取、纯化工艺以及抗氧化作用的研究

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本文以头花蓼为主要研究原料,对头花蓼总多酚的测定方法、响应面法优化提取头花蓼总多酚的条件、头花蓼总多酚的纯化工艺及其抗氧化作用做了系统研究。主要实验结论如下:(1)研究Folin-Ciocaheu比色法测定头花蓼提取液总多酚含量的适宜条件。结果表明:FC试剂2.5mL、12%Na2CO3(aq)7mL,35℃下反应40min,多酚的含量在760 m处下的吸光度呈现良好的线性关系,测定方法的平均回收率为98.66%,RSD为0.380%。该方法具有操作方便、稳定性、重现性、精密度好等优点,适宜于头花蓼提取液中总多酚含量的测定。(2)以头花蓼为原料提取多酚,在4个单因素:乙醇体积分数(V乙醇)、提取温度(T)、提取时间(t)和料液比(L-m)的实验基础上,利用响应面法及软件对提取条件进行优化,利用BBD设计模型,综合四个单因素之间的相互影响关系,得到最佳提取工艺为:乙醇体积分数(V乙醇)57.19%,提取温度(T)为80℃,液料比(L-m)为25mL/g,提取时间(t)2h。总多酚提取率理论值为4.43%。(3)研究10种大孔树脂对头花蓼总多酚的吸附和解吸效果,筛选出适合分离纯化头花蓼总多酚的树脂,并以总多酚的吸附率和解吸率为指标对HPD-722大孔树脂纯化头花蓼总多酚的工艺进行了研究。结果表明:在纯化头花蓼总多酚的试验中,HPD-722为的最佳树脂。最佳工艺条件为:最佳上样浓度为2.04.5mg/mL,最佳上样流速为2 BV/h,用体积为7.5 BV的50%乙醇溶液集中洗脱。纯化后总多酚的含量可达到59.02%。(4)对大孔树脂纯化后的精多酚进行分段萃取并采用ABTS自由基、DPPH自由基以及OH自由基反应体系对各部分进行抗氧化能力测定。结果表明头花蓼的不同极性萃取物对自由基均具有较强的清除能力,其清除率与质量浓度呈良好的量效关系。对羟基自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力最高的部位为乙酸乙酯部分,这与总酚含量最高呈现正相关性。采用高效液相色谱法初步鉴定槲皮苷是其主要抗氧化成分之一。
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