玉米顺式作用元件ABRE结合因子ABF2和ABF9的功能分析

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该论文包括三方面的工作,首先将ABF2和AFB9转入大肠杆菌中表达,并利用谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白系统纯化出ABF2和ABF9的蛋白.然后,通过凝胶滞阻实验检测ABF2和ABF9与ABRE结合的特异性.其次以玉米愈伤组织为材料,用基因轮转化法同时转入报告基因(GUS)和ABF2(或ABF9),转化后的愈伤组织经GUS染色,出现蓝色斑点,由此说明ABF2和ABF9可以激活报告基因(GUS)的表达,从而进一步说明ABF2和ABF9具有转录激活功能,是与ABRE特异结合的转录因子.最后,构建了ABF9的植物表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化方法转化为拟南芥,获得15株转基因植株.对其中的8株进行分子检测.结果PCR结果为阳性的转基因植株有6株,Northern分析为阳性的植株有4株.
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