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小檗碱是清热解毒类中药黄连的主要活性有效成分,具有减轻体重、改善糖耐量和胰岛素耐量的作用,但其确切的作用靶点尚不明确。近期研究发现小檗碱通过激活AMPK通路调节胰岛素抵抗,而体内沉默信息调节因子1(SIRT1)同样参与调控AMPK信号通路,并且其抗炎特性与胰岛素抵抗密切相关;我们对比后发现小檗碱与SIRT1在调节糖脂代谢主要靶点和生物学效应基本一致。因此,本文通过体内敲除SIRT1基因,观察小檗碱给药后小鼠胰岛素敏感性改变及脂肪组织中胰岛素敏感相关信号通路表达是否改变,探明小檗碱改善胰岛素抵抗是否依赖于SIRT1,为小檗碱治疗糖尿病的药理机制提供新的线索。目的:通过高脂饲养建立SIRT1敲除小鼠肥胖模型,应用分子生物学实验技术,观察脂肪组织,探明小檗碱干预脂肪组织中胰岛素抵抗是否依赖于SIRT1的介导。方法:1)建立高脂喂养C57BL/6系野生型和SIRT1+/-小鼠,14周复制肥胖模型并评价代谢相关指标及胰岛素敏感性指标,同时用小檗碱给药干预15天进行药效研究。2)Western blot检测脂肪组织中SIRT1的表达以及糖代谢及胰岛素信号通路AMPK、LKB1、ACC、AKT的磷酸化蛋白表达。3)采用荧光定量PCR检测脂肪组织SIRT1mRNA表达。4)采用免疫共沉淀检测PGC-1α、FOXO1的乙酰化程度。5)采用酶联免疫吸附实验检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1的表达。6)Western blot检测脂肪组织中炎症相关通路JNK、IKKβ的磷酸化蛋白表达。研究结果:1)高脂饲养12周后,野生型小鼠和SIRT1+/-小鼠体重明显上升,且在11周后SIRT1+/-小鼠体重升高更为显著。2)小檗碱给药后,与SIRT1+/-小鼠相比,野生型小鼠空腹血糖下降、体重减轻、糖耐量及胰岛素耐量都有所改善。3)小檗碱可显著上调野生型小鼠脂肪组织中SIRT1蛋白和基因的表达,且50mg/kg小檗碱作用最为显著(P<0.05),而SIRT1+/-小鼠中SIRT1的表达皆被减弱。4)小檗碱明显增加野生型小鼠脂肪组织中AMPK、LKB1、ACC、AKT的磷酸化水平,而SIRT1+/-小鼠中这些作用被减弱。5)在野生型小鼠组中,与对照组相比小檗碱降低了脂肪组织中PGC-1α和FOXO1的乙酰化表达,而在SIRT1+/-小鼠中PGC-1α和FOXO1的乙酰化明显增加。6)小檗碱可降低野生型小鼠脂肪堆积引起的IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1等炎症因子的表达,而SIRT1+/-小鼠中这些作用被减弱。7)小檗碱可以降低脂肪堆积引起炎症相关通路JNK、IKKβ的磷酸化激活,而SIRT1+/-小鼠中这些作用被减弱。结论:小檗碱通过上调SIRT1,一方面激活AMPK/AKT通路,调节能量代谢,另一方面降低JNK、IKKβ的炎症相关蛋白激活,从而改善脂肪组织胰岛素抵抗。