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神秘果叶可以改善胃酸过多、消化不良、胃口不佳等症状,对动脉硬化、高血压以及糖尿病等具有明显的疗效,并且能够增强肝胆功能、提高免疫力。本文以海南产神秘果叶为研究对象,分析了其营养成分与挥发油的化学组成与药理活性,对总黄酮的提取、纯化分离也进行了详细的研究,并测定了神秘果叶总黄酮的抗疲劳以及抗肿瘤活性,为今后神秘果叶的研究与开发提供了重要的参考。结论如下: 1.采用现代分析技术首次测定了神秘果叶营养成分、氨基酸、脂肪酸和微量元素的含量与组成。分析表明,神秘果叶含有较高的蛋白质、纤维和多糖,氨基酸种的含量为8.65 g/100g,其中包括了生物体中的18种氨基酸,必需氨基酸含量占总氨基酸含量的41.5%。脂肪酸的含量为0.94 g/100g,其中不饱和脂肪酸占总量的50%。神秘果叶矿物质元素也非常丰富,其中钾的含量最高,平均达到8668.00μg/g。结果表明神秘果叶是一种营养丰富并具有极具开发潜力的食品与药品。 2.采用水蒸气蒸馏法提取神秘果叶挥发油,利用气相色谱-质谱联用技术分析挥发油的化学成分,并对挥发油的抑菌、抗肿瘤活性进行了评价。结果表明,神秘果叶挥发油含量较高的组分为匙叶桉油烯醇、柠檬烯、邻苯二甲酸二异辛酯、邻苯二甲酸二丁酯、棕榈酸及芳樟醇。体外抗菌试验的结果表明,神秘果叶挥发油除了对绿脓杆菌没有明显的抑制作用,对其他试验菌株均具有较好的抑菌活性。抗肿瘤活性试验的结果表明,神秘果叶挥发油能够有效抑制人白血病细胞K562的增殖,IC50值为13.5μg/mL。 3.采用超声波辅助法提取海南神秘果叶总黄酮,利用响应面法优化最佳提取工艺条件。结果表明:乙醇体积分数为57.09%、液料比30.73:1 mL/g,超声时间38.14 min,提取温度61.40℃,神秘果叶黄酮的理论得率为4.14%,平均得率为(4.03±0.03)%,与预测值的相对误差为2.75%,RSD为0.82%,说明该模型是合理有效的。 4.利用大孔吸附树脂法纯化了神秘果叶总黄酮,并考察了影响树脂动态吸附与解析的主要因素,优化了神秘果叶总黄酮纯化的工艺条件。试验结果表明, HPD500型大孔树脂是纯化神秘果叶总黄酮的最佳树脂,其优化的工艺条件为:上样浓度1.4 mg/mL,上样流速1.5mL·min-1,样液 pH值6.0,洗脱液流速2.0mL·min-1和洗脱液乙醇体积分数80%。在此优化的条件下,神秘果叶总黄酮的纯度为85.5%,得率为48.3%。 5.以神秘果叶纯化后的总黄酮为研究对象,研究其对运动损伤小鼠的抗疲劳作用,并评价了其抗肿瘤活性。结果表明,神秘果叶总黄酮能明显延长小鼠游泳至力竭的时间,尤其是大剂量给药组最具明显。同时能够降低血乳酸、血清尿素氮和丙二醛的水平,提高了肝糖原的含量,增加了过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活性。抗肿瘤试验结果表明了神秘果叶总黄酮对人白血病肿瘤细胞、人肺腺癌细胞和人胃癌细胞都都具有较好的抑制活性,其 IC50值分别为10.31、38.70和88.19μg/mL。