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鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的免疫抑制性疾病,疫苗接种是预防本病的主要手段。20世纪80年代中后期由于国内外已先后出现了超强毒株和变异株IBDV,IBD免疫失败时有发生。为研制高效的疫苗,国内外学者先后成功地进行了超强毒株和变异毒株弱毒的培育,Rosenberger等首次将变异株E经CEF传代获得致弱,Kibenge等将变异株A经Vero细胞传代获得弱毒株,Tsai等分别将变异株IN和E适应在BGM-70上,经 30代和 40代,失去了对鸡的致病性。本试验以超强毒传染性法氏囊病病毒的国内分离株 GX8/99株为研究对象,将该毒株先在鸡胚传10代,又经CEF盲传22代,开始适应鸡胚成纤维细胞(CEF),并引起细胞病变,表现为细胞聚缩、细胞拉成纤丝状,死细胞粘附其上,最后变圆、脱落。到25代经2次无限稀释法克隆,获得4株克隆化病毒株。对超强毒IBDV GX8/99株的囊毒、鸡胚传代毒及其克隆化病毒分别采用AGP、免疫胶体金试纸膜及荧光抗体检测证明了IBDV的存在,这三种检测方法以免疫胶体金试纸膜法最为简单、方便、快速,并且灵敏度也非常高(可达到10-4~10-5)。对超强毒IBDV GX8/99株原始毒囊毒及其克隆化细胞毒进行ELD50测定,并对克隆化细胞毒进行TCID50测定。结果表明原代毒在鸡胚上的滴度最高,4株克隆毒的滴度稍低于原代毒。4株克隆化细胞毒的ELD50、TCID50总体上差别不明显,但是对鸡胚及CEF的亲和力表现的完全不同。克隆1在鸡胚的滴度最低但是在CEF的滴度很高,克隆2在鸡胚的滴度最高但是在CEF的滴度最低,克隆3、克隆4在鸡胚及CEF的滴度变化比较一致。表明4个克隆化毒株对鸡胚及鸡胚成纤维细胞的亲和力明显不同。说明它们是不同的克隆化细胞毒。将超强毒IBDV GX8/99株囊毒及其克隆化细胞毒,分别接种4周龄<WP=6>SPF鸡4天后的法氏囊指数均比健康对照同批鸡低1.72~3.06倍,胸腺指数均比健康对照同批鸡低,而且原代毒萎缩严重,比对照组低4.54倍,其余4个克隆化毒萎缩稍轻,比对照组低1.26~1.79倍;脾脏指数均比健康对照同批鸡高,比对照组高1.14~1.64倍,说明原代毒及克隆化细胞毒均可以引起法氏囊及胸腺萎缩、脾脏肿胀。初步揭示了超强毒IBDV GX8/99株免疫抑制的机理。本研究通过超强毒株GX8/99株在鸡胚传代、细胞适应,又经克隆化获得了4株克隆化细胞毒。接种SPF鸡致病试验表明4株克隆化细胞毒的致死率均小于6.7%,其中有两株致死率为0(克隆1和克隆4)。因此可以预见,通过该传代致弱途径,有希望获得对超强毒IBDV有预防作用的弱毒疫苗株,为有效预防超强毒IBDV的感染奠定基础。