NF-κB依赖的JNK信号通路在波动性高糖诱导HUVEC损伤中的作用以及敲减NF-κB/p65基因前后的差异表达谱研究

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目的:我们之前的研究发现,不管是持续高糖还是波动高糖下,用核因子κB (NF-κB) p65基因特异的RNA干扰(RNAi)腺病毒阻断NF-κB信号通路,可以抑制人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell, HUVEC)凋亡和增殖抑制。在此研究中,我们进一步探讨NF-κB信号通路在波动性高糖(含5.5或30.5 mM D-葡萄糖培养液,每日交替)下的作用机制。方法:利用p65特异的siRNA腺病毒感染HUVECs(其抑制效应在之前研究已被证实),同时予波动性高糖干预,Western印记法测定p65蛋白和JNK蛋白的表达。此外,通过表达谱基因芯片,监测基因在敲减NF-κB/ p65基因前后的差异表达情况。结果:波动性高糖下,NF-κBp65的激活可以进一步导致JNK的活性增加。在敲减NF-κB/ p65基因后,JNK增高的活性可以被逆转。表达谱基因芯片结果显示,波动性高糖+RNAi腺病毒感染后,相对比波动高糖组,上调了64个已知基因,下调了12个已知基因。结论:NF-κB依赖的JNK信号通路在波动高糖诱导下HUVEC增殖抑制和凋亡中的过程中起着重要作用。此外,敲减NF-κB/ p65基因后的表达谱改变中,β1整合素表达上调,以及P53结合蛋白1表达下调,对细胞的增殖和抗凋亡起到一定作用。
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