紫苏种子脂肪酸代谢及合成相关基因PfPDAT的功能分析

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紫苏(Perilla frutescens)是一种新型油料作物,种子含油量高达35%~46%,含丰富的α-亚麻酸,具有独特的活性物质和营养成分,是我国卫生部首批公布的60种药用同源的食物之一。本试验主要研究不同品种紫苏籽油中脂肪酸成分及其含量;选取α-亚麻酸含量较高且适宜在当地种植的品种进行非生物胁迫处理,分析PfPDAT基因在紫苏幼叶中的表达特性,并通过农杆菌介导的遗传转化途径将该基因成功转入烟草中,为深入研究紫苏脂肪酸生物合成途径及PfPDAT基因对不同逆境胁迫的响应机制奠定了理论基础。主要研究结果如下:(1)用气相色谱法测定13个紫苏品种种子油中脂肪酸组成及含量,结果表明:紫苏种子油主要含有亚麻酸、亚油酸、油酸、硬脂酸和棕榈酸这五种脂肪酸,其中89%为不饱和脂肪酸,亚麻酸所占比例最大,供试品种中兰田新紫苏(0084)亚麻酸含量最高,达553.18 mg/g,当地品种晋紫苏2号所含亚麻酸达523.94 mg/g,为高含亚麻酸的优质品种。(2)不同逆境胁迫处理紫苏幼苗后,通过荧光定量PCR分析得出,一定程度的胁迫处理可提高紫苏PfPDAT基因的表达量,当分别使用20%PEG、100 mmol/L NaCl和4℃处理6 h时紫苏表达量达到高峰;同时对胁迫处理后各种抗氧化酶活性进行测定,结果表明干旱处理可以降低紫苏幼苗中MDA含量,使其抗性增强,逆境胁迫下CAT、POD和SOD活性均呈现先上升后降低的趋势。(3)采用农杆菌介导法,成功构建pJC-Gly-DSRB:PfPDAT植物超表达载体,以烟草幼叶为外植体材料,进行遗传转化,经检测后获得阳性转基因植株,筛选草丁膦浓度为 1.0mg/L。
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