金银花中绿原酸的提取及在大鼠体内的吸收研究

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金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花,含有多种对人体健康有益的物质,在众多的成分中绿原酸较为丰富且具有多种活性功能,药用和纯品绿原酸的研究和开发有着极大的社会和经济效益。本文采用传统水提法、复合酶法、仿生提取法对金银花中绿原酸进行提取,以期提高提取液中绿原酸含量,其中酶法提高了绿原酸的提取率,优化出酶法提取绿原酸的最佳工艺条件。研究了金银花仿生提取物组成成分与传统水提、酶法提取工艺的金银花提取物成分的区别。研究了大孔吸附树脂纯化提取物的工艺。通过金银花提取物中绿原酸的血药浓度-时间曲线的制备,研究了金银花提取物中绿原酸在大鼠体内的吸收。  本研究主要内容包括:⑴确定酶法为绿原酸的最佳提取工艺,优化出酶法提取绿原酸的最佳工艺条件:酶解温度45℃,pH值4.5,酶复合比1.0:0.3,酶解时间1.5小时,提取。⑵大孔吸附树脂纯化金银花提取物,优化出D101大孔吸附树脂吸附和解吸附绿原酸的条件,其中分别考察了吸附柱径高比、提取液上样浓度、吸附流速、泄露曲线、洗脱剂用量、流速和洗脱曲线,优化条件如下:吸附柱径高比为1:10,上样浓度为3.6mg/mL,吸附流速为2mL/min,洗脱剂用量为100mL蒸馏水和4倍体积的30%,50%乙醇溶液,洗脱流速为2mL/min。⑶采用高效液相色谱-质谱联用技术进行分析,取得较好的分离效果。确定了提取液中3个已知化合物:绿原酸、木犀草苷、奎尼酸。其中绿原酸得到非常好的分离。⑷建立了血浆中绿原酸含量测定的高效液相色谱法,并考察色谱条件及系统适应性、线性关系、方法回收率、提取回收率等。结果表明,该方法具有较高的专属性,能准确测定血浆中绿原酸的浓度。考察绿原酸在大鼠体内的药物动力学过程。结果显示,绿原酸在体内表现为线性动力学特征。大鼠灌胃给药后具有较大的表观分布容积,表明绿原酸给药后迅速分布到体内组织中。绿原酸灌胃给药后,Tmax为0.33 h,Cmax为48.85μg/mL,AUC0-t为44.12ng·mL-1·h,AUC0-∞为95.89ng·mL-1·h,有较好的吸收。
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