二苯乙烯苷纳米颗粒的制备及其稳定性研究

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二苯乙烯苷(THSG)是何首乌中的主要活性成分,属于多羟基芪类化合物,具有降血脂、保肝、舒张血管和抗肿瘤等多种生物活性。但THSG的不稳定性限制了其在食品和医药领域的应用,而纳米包埋技术是提高THSG稳定性的潜在有效手段。本研究采用复合凝胶法制备得到了包埋THSG的纳米颗粒(THSG-NPs),对关键工艺参数进行了优化,对THSG-NPs的形貌、理化特性、稳定性和在不同pH缓冲液及模拟胃肠液中的释放行为进行了表征,并对包埋前后THSG的稳定性进行了比较,主要研究内容和结果如下:(1)基于高效液相色谱定量分析方法,考察了 THSG水溶液对光、热和pH的敏感性及在模拟胃肠液中的稳定性。结果发现,THSG水溶液在自然光照射下,THSG的半衰期(t1/2)约为2.6 h;pH 2.0时,t1/2约为1371.9 h,但随着pH值的升高其稳定性显著降低,在碱性条件下降解速度加快,如在pH 8.0和10.0时,其t1/2分别为9.6 h和7.5 h;温度对THSG的稳定性也有显著影响,温度越高、加热时间越长,THSG的降解越快。以上结果表明,THSH水溶液稳定性差,对光、热和pH敏感。(2)以壳聚糖盐酸盐(CHC)和羧甲基壳聚糖(CMC)为壁材,采用复合凝胶法制备了 THSG-NPs,并以粒径、分散性指数和包封率为指标,通过单因素和正交试验方法对其制备工艺中的关键参数进行了优化。最终得到的最佳条件为:CHC浓度1.0 mg/mL,CMC浓度2.5 mg/mL,THSG浓度为1.5mg/mL,最佳反应温度为25℃,最佳反应时间为:CMC与THSG溶液混合后反应60 min,混合液加入到CHC溶液后继续反应60 min。在此最佳工艺下,THSG-NPs的平均粒径为398.0±18.7 nm,PDI为 0.230±0.012,Zeta 电位值为 24.5±0.8 mv,包封率为 84.12±0.87%,载药量为 12.01±3.57%。TEM观察表明,THSG-NPs呈现球状颗粒,与空载纳米颗粒相比,颗粒尺寸变大,但形态没有发生明显变化。(3)考察了 THSG-NPs在不同pH缓冲液和模拟胃肠液中的释放行为。结果表明,在模拟胃液和肠液中,6 h后THSG的释放率分别为40.12±0.92%和13.09±0.17%,提示THSG-NPs在胃肠道环境中有一定的缓释效果,可延长THSG在胃肠液中的滞留时间。在pH 9.0的缓冲液中,THSG-NPs迅速溶胀破裂,THSG随之释放,释放率达到91.02-98.13%;而在pH 1.2缓冲液中纳米悬液很快变澄清,说明THSG-NPs结构被破坏,壁材溶解。THSG-NPs冻干粉在弱酸性条件(pH 5.8)下复溶性良好,复溶后的悬液粒径分布在300-500 nm之间。(4)考察了纳米包埋对THSG稳定性的影响,结果表明THSG-NPs显著提高了THSG光稳定性和热稳定性。经自然光照射10 h后,THSG降解率为89.60%,而THSG-NPs中THSG降解率为25.62%;60℃水浴条件下放置36 h后,THSG-NPs和THSG的降解率分别为16.97%和29.48%,但温度在80℃以上时,包埋前后THSG的稳定性无显著差异。
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