从海马神经递质变化探讨穴位注射抗运动性中枢疲劳机制

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fly_wing
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研究目的:建立运动性疲劳动物(大鼠)模型,从形态学和海马形态结构评价抗疲劳的疗效,从海马相关神经递质兴奋-抑制功能的动态平衡入手,探讨穴位注射防治运动性中枢疲劳的作用机制。研究方法:将24只大鼠随机分为空白组(0.2 mL生理盐水穴位注射)、运动21天组(0.2mL生理盐水穴位注射)和人参总皂甙穴位注射组(0.2 mL人参总皂甙穴位注射)等3组。除空白组大鼠(正常饮食)外,其余各组以高60cm、直径55cm的塑料圆桶作为大鼠游泳槽,水深50cm,水温33±2℃,适应症性训练2天后,于实验第3天开始正式实验。每天穴位注射(单侧,足三里和内关,隔天交替)给药一次,注1小时后,除空白组大鼠外,其余各组大鼠每天游泳训练2次,每次自由游泳15min,间隙10min,连续训练21天(实验至第23天)。为保证游泳训练质量,准备木棍驱赶扒在桶池壁边缘或其他大鼠身上休息的大鼠。为保证大鼠训练安全,而当大鼠力竭时,则停止其游泳训练。于末次运动后,对各组大鼠体重、自主活动次数、海马超微结构、海马神经元细胞凋亡、海马相关神经递质(NE、 5-HT、DA、Ach、Glu、GABA)含量进行检测。研究结果:1.与空白组比较,模型组大鼠体质量降低(p<0.01)、注射组大鼠体质量体质量无显著差异(p>0.05);与模型组比较,穴位注射组大鼠体质量显著增加(p<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠和穴位注射组大鼠自主活动均显著减少(均有p<0.01);与模型组比较,穴位注射组大鼠自主活动显著增多(p<0.01)。2.经甲苯胺蓝染色,空白组大鼠海马神经元呈整齐致密排列状,细胞间质密度高、且均匀,细胞核大多呈深染状、核仁清晰可见,此外,神经细胞内尼氏体清晰可见,均匀分布于细胞质;而模型组大鼠海马神经元呈紊乱松散排列状,细胞周围间隙增宽,细胞分布不均匀,多数细胞呈结构不完整状、部分细胞固缩、形状不规则,单个细胞胞体肿胀变大变圆,细胞浆染色变浅且模糊不清,细胞核浓缩、其核仁不甚明显,细胞内尼氏体减少;而穴位注射组大鼠病理改变不明显,神经元排列、单个神经元结构均与空白组类似。3.与空白组相比,模型组、穴位注射组大鼠海马凋亡细胞(阳性细胞)数和阳性面积比均显著性增加(均有p<0.01);与模型组相比,穴位注射组大鼠海马凋亡细胞(阳性细胞)数和阳性面积比均有显著性减少(均有p<0.01)。4.与空白组相比,模型组大鼠海马NE含量显著升高(p<0.01),穴位注射组大鼠NE含量无显著差异(p>0.05);与模型组比较,穴位注射组大鼠海马NE含量显著降低(p<0.01)。与空白组相比,模型组大鼠海马5-HT含量显著升高(p<0.01),穴位注射组大鼠5-HT含量无显著差异(p>0.05);与模型组比较,穴位注射组大鼠海马5-HT含量显著降低(p<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠和穴位注射组大鼠DA含量均显著降低(均有p<0.01);与模型组比较,穴位注射组大鼠DA含量显著升高(p<0.01);与空白组比较,模型组大鼠和穴位注射组大鼠Ach含量均显著降低(均有p<0.01);与模型组比较,穴位注射组大鼠Ach含量显著升高(p<0.01)。5.与空白组相比,模型组大鼠海马Glu含量显著升高(p<0.01),穴位注射组大鼠Glu含量无显著差异(p>0.05);与模型组比较,穴位注射组大鼠海马 Glu含量显著降低(p<0.01)。与空白组相比,模型组和穴位注射组大鼠海马GABA含量均显著升高(p<0.01);与模型组比较,穴位注射组大鼠海马GABA含量显著降低(p<0.01)。与空白组相比,模型组大鼠海马GABA/Glu显著升高(p<0.01),穴位注射组大鼠GABA/Glu无显著差异(p>0.05);与模型组比较,穴位注射组大鼠海马GABA/Glu显著降低(p<0.01)研究结论:1.以“高60cm、直径55cm的塑料圆桶作为大鼠游泳槽,水深50cm,水温33±2℃,使大鼠每天进行游泳训练2次,每次自由游泳15min,间隙10min,连续训练21天,在大鼠游泳训练中,用木棍驱赶扒在桶池壁边缘或其他大鼠身上休息的大鼠,而当大鼠力竭时,则停止其游泳训练”为造模方法,可以复制成功运动性疲劳动物(大鼠)模型。2.穴位注射人参总皂甙,能达到抗疲劳疗效,能使运动性疲劳大鼠体质量增加、自主活动显著增多,运动性疲劳大鼠海马神经元损伤得到明显逆转、神经元排列、单个神经元结构均得到改善,运动性疲劳大鼠海马凋亡细胞数和阳性面积比均显著性降低。3.穴位注射人参总皂甙抗疲劳的可能机制是,能降低运动性疲劳大鼠海马NE、5-HT、Glu和GABA含量,升高其 DA和Ach含量,逆转海马相关神经递质合成代谢紊乱的情况,恢复海马兴奋-抑制功能的动态平衡。
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